2019 Fiscal Year Annual Research Report
The treatment of malignant melanoma with the combination of immunocheckpoint inhibitors and local immunotherapy
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16K10179
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| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
門野 岳史 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (80292910)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 悪性黒色腫 / PD-1 / CTLA-4 / poly IC |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は引き続き種々の条件下での免疫チェックポイント阻害薬と局所免疫の併用による悪性黒色腫に対する治療効果の検討を行った。B16F1悪性黒色腫細胞をC57BL/6マウス背部に20万個打ち、腫瘍が形成された段階で、抗PD-1抗体もしくは抗CTLA-4抗体を10mg/kg腹腔内に２回投与し、その後の腫瘍の成長速度を計測した。これら免疫チェックポイント阻害薬に加えて、腫瘍局所にアロもしくは同種の免疫グロブリンを注射し相乗効果が得られるかどうかについて検討を行った。さらに、polyICの局所注射やイミキモド外用もしくは局所注射を組み合わせて、どの組み合わせが最適かについての検討を継続した。抗PD-1抗体にアロ免疫グロブリンを加えると腫瘍抑制効果が軽度増強した。さらに、poly ICを加えることで、一層の腫瘍抑制効果を示す傾向が得られた。
これらのマウスより腫瘍組織を取り出し、CD4やCD８、さらにはF4/80を用いた免疫染色を行い、浸潤細胞のプロファイルについて検討を行った。浸潤細胞数は基本的に腫瘍量と相関した。抗腫瘍効果が高いと腫瘍が小さいこともあり、浸潤細胞数と抗腫瘍効果の間に明らかな差は見られなかった。次に腫瘍局所の組織より、TNF-α、IL-6、IL-10といった各種サイトカインのreal-time PCRを行った。IL-10に関しては抗腫瘍効果が高い場合に低い傾向が見られ、IL-6が増加している傾向がみられた。また、IL-10に関しては血清中のIL-10をELISAで測定したところ、抗腫瘍効果が高い場合に低値を示す傾向が見られた。これらの結果より、抗PD-1抗体もしくは抗CTLA-4抗体に加えてアロ免疫グロブリン、さらに、poly ICを加えることで、IL-6の増加及びIL-10の低下により腫瘍抑制効果が増強したと考えられた。
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