塩化ラジウムー223治療におけるリンパ球DNA損傷に関する研究

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10366
• Research Institution: Kanazawa Medical University
• Principal Investigator: 渡邉 直人 金沢医科大学, 医学部, 教授 (40210926)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩淵 邦芳 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10232696) ; 道合 万里子 金沢医科大学, 医学部, 助教 (40515673)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 塩化ラジウム－２２３ / 放射線内部照射治療 / リンパ球 / DNA損傷

Outline of Annual Research Achievements

前立腺癌の多発性骨転移に対する治療として塩化ラジウム－２２３を用いた放射線内部照射治療が近年認可された。しかしながら、実際には塩化ラジウム－２２３を用いた放射線内部照射治療では、軽度ながら様々な副作用が報告されている。特にリンパ球に関しては、血中数の一過性の減少を認めた報告がある。ところが、塩化ラジウム－２２３を用いた放射線内部照射治療に伴う、生体内のリンパ球自体への影響である放射性組織障害に関して、DNA損傷を直接評価する検討は現在まで見られない。そこで今回、塩化ラジウム－223を用いた放射線内部照射治療について、血液の内で最も放射線感受性が高いと考えられているリンパ球に対して、どの程度の放射性組織障害が出現するのか、DNA損傷部位に集積することが知られているおよびγ-H2AXを用いて基礎的に検討しようと考えた。両蛋白質に対する抗体で細胞の免疫染色を行うと、DNA損傷部位が核内の点として染色され光学顕微鏡でDNA損傷の個数を数えることができる。
対象患者血液中のリンパ球を分離し、DNA損傷部位に集積することが知られているγ-H2AXを用いて細胞の免疫染色を行う。DNA損傷部位が核内の点として染色され、光学顕微鏡でDNA損傷の個数を数え、治療前後の末梢血リンパ球に発生するDNA損傷数の定量測定を行う予定であった。放射性組織障害よって起きうるリンパ球のアポトーシスを評価するために、治療前後の末梢血リンパ球をTUNEL(TdT-mediatated dUTP-biotin nick end labeling)法にて免疫染色してアポトーシス細胞を定量評価する予定であった。しかしながら、平成２８年度は対象患者が存在しなかったために成果があげられなかった。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

前立腺癌の多発性骨転移に対する治療として塩化ラジウム－２２３を用いた放射線内部照射治療は、平成２８年度は前立腺癌患者の治療経過としてまだ治療は施行されていない。従って、対象患者はみられなかったため患者より採血した末梢血リンパ球に発生するDNA損傷数を定量することができなかった。それにつれて、正常者のリンパ球にIn vitroでＸ線外部照射する実験で外部照射してできるDNA損傷数の測定も施行されていない。

Strategy for Future Research Activity

前立腺癌の多発性骨転移に対する治療として塩化ラジウム－２２３を用いた放射線内部照射治療は、平成２９年度は前立腺癌患者に対して治療が計画されている。従って、対象患者の同意が得られれば、患者より採血した末梢血リンパ球に発生するDNA損傷数を定量することが可能である。それにつれて、正常者のリンパ球にIn vitroでＸ線外部照射する実験で外部照射してできるDNA損傷数の測定も施行する予定である。