2016 Fiscal Year Research-status Report
高転移性乳癌細胞は転移抑制性miRNAsをexosomeに内包して細胞外に捨てる
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16K10482
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
伊藤 裕子 大阪医科大学, その他部局等, 功労教授 (40148432)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴田 雅朗 大阪医科大学, 医学部, 准教授 (10319543)
Eid NabilA.S. 大阪医科大学, 医学部, 講師 (50570165)
濱岡 仁美 (黒瀬仁美) 大阪医科大学, 医学部, 講師 (80545608)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 乳癌細胞 / リンパ行性転移 / VEGF-C / microvesicle / miRNA / hypoxia |
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| Outline of Annual Research Achievements |
さきの研究で、高転移性のマウス乳癌細胞ではVEGF-Cを強く発現してリンパ管新生が盛んであるために転移が促進されていた。Microvesicles (MVs) の一種shedding bodyに内包される分泌型CEACAM-1が、またMVsにprecursor VEGF-Cが内包放出されリンパ管新生に寄与していた。今回、miRNAに注目したところ高転移性の乳癌細胞ではVEGF-Cを抑制的に調節するmiR-27bをMVsにて排出していると想定された。乳癌などの固形癌では、中心部には血管が少なく低酸素状態であると想定されている。そこで、normoxiaとhypoxiaで細胞内およびMVsに内包されるVEGF-C, miR-27bを計測し、Western blotおよびRT-PCRで比較検討した。normoxia でVEGF-C の発現は高転移性の乳癌細胞(BJMC3879)において、細胞内、MVsともに高かった。hypoxiaでBJMC3879の細胞内VEGF-C発現はnormoxiaと変わらなかった。低転移性の乳癌細胞(BJMC338)では細胞内の成熟型VEGF-C発現は低く、MVs内のprecursor VEGF-Cも低かったが、hypoxiaではBJMC3879と同程度に発現していた。miR-27bの発現はBJMC338ではhypoxiaで細胞内の発現量が有意に増加するが、BJMC3879では差がなかった。一方、MVs内のmiR-27bの発現は両者の乳癌細胞でnormoxiaと比較して有意に増加おり、BJMC3879で高かった。しかしながら、BJMC338ではnormoxiaと比較して増加率はBJMC3879よりも大きかった。以上の結果は「高転移性のマウス乳癌細胞ではVEGF-Cを抑制的に調節するmiR-27bをMVsにて排出している」と言う想定を支持する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
VEGF-CをターゲットとするmiRNAが高転移性の乳癌細胞では、hypoxiamicrovesiclesに内包されて分泌されていた。また、細胞内のVEGF-Cは高転移性の乳癌細胞では変化しないことが確認されたから。
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| Strategy for Future Research Activity |
１）２種類の乳癌細胞にmiR-27bをnormoxiaとhypoxiaで過剰発現させ、Western blot にてVEGF-Cの発現変化を検討する
２）２種類の乳癌細胞でnormoxiaとhypoxiaでmiR-27bをノックダウンし、Western blot にてVEGF-Cの発現変化を検討する
３）保有しているBJMC338、BJMC3879の移植腫瘍パラフィンブロックよりレーザーマイクロダイセクションにてRNAを抽出し、in vivoにおけるmiR-27bの発現量を計測する。
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| Causes of Carryover |
設備備品として申請したネッパジーンのスーパーエレクトポレーションNEPA21, typeIIはおよそ2000,000円と高額であり、経費の５０％を占めてしまうため、他の導入方法を検討していたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
導入方法として、リポフェクチンによる導入を先に施行してみる。
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[Journal Article] Evaluation of Angiogenesis during Bone Regeneration Following Leukocyte and Platelet-Rich Fibrin (L-PRF) and Artificial Bone Insertion Prior to Implant Placement.2016
Author(s)
N. FUKUI, P.K. MOY, A. HIRATA, Y. ITO, Y. KIMURA, Y. NAKAJIMA, N. KATO-KOGOE, S. KASUYA, K. YAMAMOTO, H. TERAI, and T. UENO.
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Journal Title
Bulletin of the Osaka Medical College
Volume: 62
Pages: 11-18
Peer Reviewed
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[Journal Article] PTBP1-associated microRNA-1 and -133b suppress the Warburg effect in colorectal tumors.2016
Author(s)
Taniguchi K, Sakai M, Sugito N, Kumazaki M, Shinohara H, Yamada N, Nakayama T, Ueda H, Nakagawa Y, Ito Y, Futamura M, Uno B, Otsuki Y, Yoshida K, Uchiyama K, Akao Y.
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Journal Title
Oncotarget.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Perturbation of energy metabolism by fatty-acid derivative AIC-47 and imatinib in BCR-ABL-harboring leukemic cells.2016
Author(s)
Shinohara H, Kumazaki M, Minami Y, Ito Y, Sugito N, Kuranaga Y, Taniguchi K, Yamada N, Otsuki Y, Naoe T, Akao Y.
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Journal Title
Cancer Lett.
Volume: 371
Pages: 1-11
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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