2018 Fiscal Year Annual Research Report
Role of KLF4 expression in gastric cancer.
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16K10492
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
橋本 伊佐也 富山大学, 附属病院, 助教 (50649283)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奥村 知之 富山大学, 附属病院, 講師 (10533523)
長田 拓哉 富山大学, 附属病院, 講師 (40303242)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | KLF4 / 胃癌 / CTC |
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| Outline of Annual Research Achievements |
＜研究の目的＞我々はiPS 誘導因子の内 KLF4 の発現低下が, 胃癌切除後の独立した予後不良因子であることを報告してきた. 他方で, 胃癌患者末梢血中のCTC(Circulating tumor cells)を同定し, 治療後に減少する結果を報告している. 更にCTC 中の KLF 発現は低下する結果を得ている. 上記研究結果より, KLF4 に着目し胃癌組織及び, 胃癌患者末梢血中CTCのKLFの発現の有無が, 胃癌治療のサロゲートマーカーになりうるかを検証する. ＜研究実施計画書＞・胃癌細胞株での KLF4 の発現の解析を行うとともに, EMT因子発現を解析する. ・胃癌患者末梢血中のCTCの同定, 採取, 解析を行う. ＜結果＞胃癌細胞株のうちKATOⅢにおいてKLF4高発現を認めた. (Cell blockにおける免疫染色).
KATOⅢのKLF knock down株 (Si-KLF4)では浸潤、遊走能が亢進した. 各種胃癌細胞株においてKLF4の低発現, 無発現は認めず, Overexpression株作成は困難であった.胃癌患者末梢血中のCTSCはFACSによる分離が安定しない結果であった. 新たなCTC捕捉システムとして, 抗EpiCAM抗体をコーティングしたチップを用いてCTCを捕捉した.捕捉した細胞を抗体, EpiCAM抗体ならびに抗体CK18抗体を用いて免疫染色し, 共焦点レーザー顕微鏡にて陽性細胞を確認した. 同一患者の胃癌組織標本を用いた免疫染色にてKLF4陽性,E-Cadherin陽性組織をもつ患者より, CTSCを採取し, 抗KLF4抗体, 抗E-Cadherin抗体で免疫染色を施行した. CTSC上はKLF4陰性, E-cadherin陰性であり, 血中に移行した胃癌細胞ではEMTを獲得し, 同時にKLF4発現が低下する結果が得られた.
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