制限増殖型レオウイルスに光線療法を併用した新しい集学的癌治療法の開発

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10506
• Research Institution: Oita University
• Principal Investigator: 衛藤 剛 大分大学, 医学部, 講師 (00404369)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 猪股 雅史 大分大学, 医学部, 教授 (60315330) ; 平塚 孝宏 大分大学, 医学部, 助教 (20600886) ; 西園 晃 大分大学, 医学部, 教授 (70218155)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 遺伝子改変型レオウイルス / 光療法 / 5-アミノレブリン酸

Outline of Annual Research Achievements

制限増殖型レオウイルスはras経路が活性化している癌細胞に選択的に感染・増殖する。我々はこれまでレオウイルスが消化器癌の標的となりうることを報告してきた。一方、実地臨床では、癌特異的で正確な転移診断法に基づく治療戦略の構築が急務である。そこで、今回ALA導入レオウイルスの開発による癌特異的存在診断法に基づき、ALA導入レオウイルス療法およびALAによる抗腫瘍効果増強を期待した光線療法の新規ウイルス光線療法の開発を行う。
今回、Reverse genetics法により、ALAの代わりに近赤外蛍光蛋白質iRFP720遺伝子をL1分節に挿入した組換えレオウイルスの作成に成功し、感染細胞における近赤外蛍光の発現も確認された。近赤外光は生体透過性が高く、自家蛍光も低いため、生体イメージングや光線療法においても近年脚光を浴びている。しかし、組換えレオウイルスの増殖性は野生型レオウイルスに比べて低下していたため、今後、改良を加えて本研究の目的に資する、より高い抗腫瘍効果と蛍光機能を持つウイルスを作成・選別する。
また、光療法について我々はこれまで動物実験において特定の波長の光が、抗炎症作用を示すことを報告してきた（Hiratsuka T et al.JGH 2014）。近年ではin vitroで抗腫瘍作用を示す報告があり（Yazan SK et al. Lancet,2015）、この作用は光増感物質である5-アミノレブリン酸(ALA)により増強される。現在、胃癌細胞株MKN-45を用い、532nmの波長の照射により、抗腫瘍効果を検討中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

これまで、レオウイルスへの遺伝子導入方法としてのReverse genetics法がうまくいかなかったが、大阪大学微生物病研究所　ウイルス複製研究グループより、Reverse genetics法のノウハウを教授してもらい、その後我々のグループでも蛍光遺伝子導入が可能となった。

Strategy for Future Research Activity

現在、計画に沿って順調に研究が進んでいる。今後は遺伝子改変型ウイルスに改良を加え、より高い抗腫瘍効果と蛍光機能を持つウイルスを作成・選別する。
胃癌細胞株を用いた光線照射実験系は確立しているので、30年度は遺伝子改変型ウイルスとの併用療法を行っていく。