TEMPO-RNPによる動脈硬化における酸化ストレス発生の予防

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10709
• Research Institution: Dokkyo Medical University
• Principal Investigator: 滝川 知司 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (60450227)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山本 哲哉 横浜市立大学, 医学部, 教授 (30375505) ; 丸島 愛樹 筑波大学, 医学医療系, 講師 (40722525) ; 高野 晋吾 筑波大学, 附属病院, 病院講師 (50292553) ; 伊藤 嘉朗 筑波大学, 附属病院, 病院講師 (90733014)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 動脈硬化 / 血管保護作用 / TEMPO-RNP

Outline of Annual Research Achievements

高血圧、糖尿病、脂質異常症などのメタボリックファクターは、動脈硬化の形成に関与する重要な因子であるが、生体内の酸化ストレス状態をコントロールすることでメタボリックファクターによる全身の動脈硬化の進行を抑制する効果が期待できる。近年我々のグループは、強いフリーラジカル消去作用をもつニトロキシルラジカル (2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl:TEMPO)をミセル化した新規DDS化フリーラジカル消去剤Radical-containing nanoparticle (RNP)を開発し、脳虚血再灌流障害においてRNPが血中から脳組織内に移行し、脳保護作用により脳梗塞を抑制することを明らかにした。本実験は、ラット頚動脈内膜肥厚モデルに対する、新規活性酸素消去剤であるTEMPO-RNP(RNP)を用いた血管保護効果（狭窄予防効果）を検証することが目的である。
動脈硬化症及び血管形成術後再狭窄を模したものとして、ラット頚動脈内膜肥厚モデルを使用した。RNPを同モデルに静脈投与し、投与後一定期間（1、7、14日間）飼育した後に安楽死させ頚動脈を採取し、それぞれの群においてローダミン標識RNPの血管壁への分布状態を免疫組織学的染色で評価した。正常側と病変側での比較を行い、投与後1日目より狭窄部内膜肥厚内にRNPが浸透していることを確認した。経日数的に浸透しているRNPが増加していることを確認した。
また、モデルラットに薬剤投与後14日間飼育した後で安楽死させ頚動脈を採取し、RNPの経静脈投与群において対照群と比較して新生内膜増殖面積、内膜/中膜面積比、収縮リモデリングが抑制されており、それにより血管内腔残存率がRNP投与群で大きいことを確認できた。
RNP投与群と対照群と比較して、体重減少、創部治癒に関し、2群間で差は認めず、RNP投与による安全性を確認した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

TEMPO-RNPの動脈硬化性変化への浸透、および頚動脈狭窄抑制作用は確認できたが、定量的評価までは行えていない。
そのため、学会、論文による報告が行えていない。

Strategy for Future Research Activity

TEMP-RNP浸透を定量的評価、および血管内膜肥厚に関与する炎症性変化、サイトカイン、活性酸素代謝を定量的に評価することで、TEMPO-RNPの血管保護作用の機序を評価する。
結果を学会、論文報告する。

Causes of Carryover

定量的評価が施行できておらず、そのための機材、試薬を使用しなかったため。
そのため、学会や論文による結果報告まで至らなかったため。