2017 Fiscal Year Research-status Report
悪性グリオーマ幹細胞マーカーALCAMを標的とした新規免疫療法の確立
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16K10755
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
藤本 康倫 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (80589789)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
阿知波 孝宗 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (00771908)
福永 貴典 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (30745005)
香川 尚己 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (50444542)
福屋 章悟 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (50726502)
有田 英之 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), その他 (60570570)
永野 大輔 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (70726520)
木嶋 教行 独立行政法人国立病院機構大阪医療センター(臨床研究センター), その他部局等, 研究員 (80534627)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 悪性グリオーマ / ALCAM / CD166 / CD6 / 免疫療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
悪性グリオーマ幹細胞に強発現しており、膠芽腫において細胞増殖と浸潤に関与している細胞表面抗原ALCAM (Activated leukocyte cell adhesion molecule)とそのリガンドであるCD6の細胞免疫反応について検討を行っている。
ヒト及びマウスのグリオーマ細胞株でのALCAMの発現について解析し、CD6-ALCAM結合による免疫反応の評価のため実験系の確立を目指している。異種反応が生じない同種マウスでの実験系が理想であるが、ALCAM陽性グリオーマ細胞株が存在せず、確立に難渋している。
悪性グリオーマの手術摘出標本におけるCD6陽性T細胞の存在頻度と局在を免疫組織染色により検討している。当院倫理委員会の承認の上、ALCAMの発現頻度が高いGradeⅣの膠芽腫標本を中心に、免疫組織染色によりCD6陽性T細胞の検索を行っている。解析を行った標本では、腫瘍内浸潤リンパ球は認めるが、CD6陽性T細胞は認めない結果となった。更に追加症例に対して免疫組織染色による検討に加え、RT-qPCRなどの別の評価方法も行うことにより、腫瘍細胞におけるALCAMの発現との相関性について解析を行う。
悪性グリオーマにおけるALCAMの発現の意義について、更に見知を広げるため、小児悪性グリオーマである髄芽腫でもALCAMの発現について解析を行っている。症例により腫瘍細胞のALCAM発現に差異が見られた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
CD6-ALCAM結合による免疫反応の評価のため、CD6陽性T細胞とALCAM陽性悪性グリオーマ細胞と共培養を行う予定であったが、ヒト腫瘍細胞株を用いた実験系ではHLAが相同するリンパ球の確保が困難であった。
マウスでのグリオーマ自然発生モデルの作成により、マウスCD6陽性T細胞とマウスALCAM陽性グリオーマ細胞株の反応性の検討を予定していたが、グリオーマ自然作成モデルの作成が技術的に困難であり、代わりにC57BL/6マウスより樹立されたマウスグリオーマ細胞株GL261での検討を行うこととした。しかし、GL261のALCAMの発現をflowcytometryで検討したが、発現は認めなかった。ALCAMの強制発現によりCD6-ALCAM結合による免疫反応の評価に用いることができるか検討中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
CD6-ALCAM結合による免疫反応の評価のため、同種でのALCAM陽性腫瘍細胞株とCD6陽性T細胞を使用した実験系が可能かどうか、引き続き検討を行っていく。
悪性グリオーマの手術摘出標本に対しての検討は今後、さらに症例数を増やし、腫瘍におけるALCAMの発現とCD6陽性T細胞の存在についての関係性を検討していく。凍結標本が使用可能な症例では、RT-qPCRによるALCAMとCD6の発現量解析も行っていく。
小児悪性グリオーマである髄芽腫で認めたALCAMの発現の差異については、臨床情報や近年コンセンサスとなった分子学的分類との関係性について追求を行っていく。
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| Causes of Carryover |
研究計画が予定よりも遅れ、一部実施困難な実験が存在するため、購入予定であった試薬や動物について、購入を行わなかったことによる。これらは次年度に持ち越し、翌年度分の助成金と合わせて、解析のための試薬に使用する予定である。
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