新規癌抗原分子KIF20Aの神経膠腫における発現・機能解析

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10770
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 三輪 点 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (20365282)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: KIF20A / 新規癌抗原分子 / 神経膠腫細胞株

Outline of Annual Research Achievements

本研究は新規癌抗原KIF20A（Kinesin family member 20A）が神経膠腫の分子治療標的となりうるかを検証するものである。新規癌抗原KIF20Aは膵癌を中心にすでに免疫治療の標的分子として期待されているが、本分子は癌細胞の増殖に強く関与することからOncoantigenという理想的な癌抗原として特に期待されている。我々はすでに複数の神経膠腫組織や細胞株でKIF20Aが高発現し、Kockdown Assayで増殖抑制効果を示すという結果を得ており、神経膠腫でのさらなる発現・機能解析を試みることでKIF20Aを標的とした新たな治療法の開発を目指すことを目的としている。
本年度は各種神経膠腫細胞株・神経膠腫患者組織・脳腫瘍幹細胞株・他の癌腫細胞株におけるKIF20Aの発現解析をWestern blotによって行った。さらにSYBR greenを用いたquantitative PCRでも発現解析を行うことで定量的な評価も可能になり、Western　Blotの結果の再現性を検討した。その結果、新規癌抗原KIF20Aは正常脳組織や他の癌腫細胞株と比較して神経膠腫細胞株・神経膠腫患者組織において強く発現していることが確認できた。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

おおむね順調に進んでいるが、当初の研究計画では、本年度にKIF20Aの機能解析まで行う予定であったが、それが達成することができなかったため、やや遅れている、との評価に至った。

Strategy for Future Research Activity

今後はKIF20Aの機能解析を行う。またin vivoでの抗腫瘍効果を検討することが不可欠であるため、担癌（神経膠腫）マウスモデルにおけるKIF20A阻害がもたらす抗腫瘍効果の評価を行っていく。

Causes of Carryover

効果的に物品調達を行った結果であり、次年度の研究費と合わせて試薬・消耗品などの購入に充てる予定である。

Expenditure Plan for Carryover Budget

KIF20Aの機能解析として、siRNAによるKIF20A阻害下における細胞周期をFACSで解析する。アポトーシス誘導能に関してはCaspase 3/7 activityを測定することで評価する。KIF20A阻害下でのAutophagy誘導の有無の証明にはAutophagy marker(LC3/p62)の発現をWestern blotで調べることで評価する。これらの試薬、消耗品の購入に使用する。