2016 Fiscal Year Research-status Report
小胞体ストレス応答経路を介した骨格筋の機能保全システムの解明
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16K10836
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| Research Institution | Shokei Gakuin College |
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Principal Investigator |
東門田 誠一 尚絅学院大学, 総合人間科学部, 准教授 (40415237)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 小胞体ストレス / 筋骨格系 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨格筋における小胞体ストレス応答経の機能を確認するために、骨格筋特異的な遺伝子欠損マウスを用いて機能解析を行った。遺伝子欠損マウスは、hmuscle actinのプロモーターにCreを持つマウスと、小胞体ストレスセンサーの一つをloxpで挟んだアレルを持つマウスを交配させることによって作成されている。このマウスの骨格筋の組織切片を作成して、観察してみると、筋繊維の萎縮が起きていることが観察された。
一方、小胞体ストレスセンサーの筋細胞の分化に果たす役割を確認するためC2C12細胞を用いて１）小胞体ストレスセンサー分子の筋細胞における局在の確認と2）分化過程における小胞体ストレス応答の活性化の確認を行った。
１）C1C12の培地の血清を１０％から２％に変えて、筋細胞への分化刺激を行い1～２週間培養を行い、筋管の形成を行った。この分化した筋細胞に対して免疫組織化学染色を実施した土師ところ小胞体ストレスセンサー分子の局在はリアノジン受容体とは重ならないことが分かった。このことから、小胞体ストレスセンサーは筋小胞体とは異なる部位に局在している可能性が高いことが分かった
２）C２C１２の分化刺激による筋管への形成過程において、小胞体ストレスセンサーが活性化することがわった。特に分化段階の中期から後期で活性化することが分かった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究機器の整備に関して遅れがあり、そのため若干、ペースが遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は筋細胞分化の際に、小胞体ストレスセンサーの阻害剤を添加し、その影響の確認を詳細に行っていく。遺伝子改変マウスの分析を詳細に行う。
筋細胞における小胞体ストレスセンサーの局在を明らかにするとともに、共役して働くタンパク質分子の同定を行っていく。
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| Causes of Carryover |
大学の移動後の研究環境の整備に遅れがあり、実験の実施に遅れが出た。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
初年度の後期に、現所属にて予定している研究機器の整備が行われたため、研究の急速な取り組みを行う予定である。また今年度、前所属である慶應義塾大学医学部の共同利用施設の申請を行い、最新機器を用いても迅速に研究を進める計画である。
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