糖尿病患者における術後痛増強への酸感受性イオンチャネルの関与の解析

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10983
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 草間 宣好 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (60336691)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 祖父江 和哉 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (90264738)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 術後痛 / ASIC / 糖尿病

Outline of Annual Research Achievements

糖尿病における術後痛の増強に対するASICs(Acid-Sensing Ion Channel)の関係を明らかにすることが、本研究を行う目的である。平成28年度の研究計画では、術後痛モデルを使用する前段階の準備実験を完遂することを目標としていた。主な実験内容としては、糖尿病ラットにおけるASICチャネルの変化を電気生理学的手法、免疫組織染色法により検討することであった。Ⅱ型糖尿病ラットおよびコントロールのラットで、脊髄後根神経節細胞に発現する主要なASICチャネルの構成を、以下の２つの方法で明らかにする予定であった。
①後肢の筋肉内にカルボシアニン色素(Dil)を注入し、脊髄後根神経節細胞を逆行性に標識する。標識された脊髄後根神経節細胞を分離培養し、電気生理学的手法（Whole-cell patch-clamp法）を用いて発現しているASICsのチャネル特性を測定する。細胞外液のpHを7.4から酸性(pH4.0-6.0)に変化させた時に生じるASIC電流を電気生理学的手法（Whole-cell patch-clamp法）を用いて測定し解析する。この際、各種ASIC阻害薬（PcTX; ASIC1aホモマルチマーの選択的阻害薬、 amiloride; ASICの非特異的阻害薬）のproton-gated currentに対する抑制効果も検討する。
②免疫組織染色法により、脊髄後根神経節細胞における各アイソファーム(ASIC1-4)の発現をⅡ型糖尿病ラットおよびコントロールのラットで明らかにする。
本年度は、脊髄後根神経節細胞を分離培養して実験を行うことができず、研究が遅れてしまった。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

脊髄後根神経節細胞を分離培養して実験を行うことができなかった。このため電気生理学的手法、免疫組織染色法による研究をすすめることができなかった。

Strategy for Future Research Activity

脊髄後根神経節細胞を分離培養して予定された研究を進める。研究を進めるためにより多くのエフォートを割く。

Causes of Carryover

実験を十分に進めることができず、次年度に繰り越しとなった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

昨年度および本年度に予定した研究を進め、計画した実験に使用します。