前立腺癌に対するX線及び重粒子治療におけるスタチン併用効果の基礎的研究

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10995
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 関根 芳岳 群馬大学, 大学院医学系研究科, 助教 (00516370)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 前立腺癌 / スタチン / DNA修復

Outline of Annual Research Achievements

昨年度の研究で認めた、前立腺癌細胞株（PC-3, LNCaP-LA;androgen free条件で長時間培養して獲得したandrogen independentなLNCaP株, 22RV-1）へスタチンを投与した後の、BRCA1、BRCA2、RAD51, BARD1, FANCAなどのDNA修復/相同組換えと関連した遺伝子のmRNA発現変化を、ウェスタンブロットにより、タンパクレベルでも確認したところ、BRCA1の発現低下（LNCaP-LA, 22RV-1)、RAD51の発現低下（PC-3, LNCaP-LA)、FANCAの発現低下（PC-3,22RV-1)、BRAD1の発現低下（PC-3,LNCaP-LA)を認めた。BRCA2に関しては、いくつか抗体を試してみたが、うまくタンパクを検出することが困難であった。次に、前立腺癌細胞株へ、X線を照射し、スタチンとの併用効果について、細胞増殖に関してはcell countを行ったところ、LNCaP-LAと22RV-1では、スタチンとX線を併用することで、さらなる細胞増殖抑制効果を認めたが、PC-3では、スタチン投与のみでかなり増殖抑制効果が強く出ることから、現在、併用条件について、検討中である。また、PARP阻害剤の併用に関しては、まずは、スタチンとの併用のみで効果を確認したが、PC-3、LNCaP-LA、22RV-1において、スタチンとPARP阻害剤であるOlaparibの併用により、MTSアッセイおよびcell countにおいて、さらなる増殖抑制効果を認めた。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

評価する遺伝子・細胞株が多く、また検討項目も多いことから、時間がかかっている。特に、BRCA2に関しては、ウェスタンブロッティングで、タンパクを検出することが困難で、様々な条件の検討（複数の抗体の使用など）を行ったことから、非常に時間がかかってしまった。

Strategy for Future Research Activity

X線での実験は開始できたため、同様の手法で、重粒子の実験も進めていく予定である。

Causes of Carryover

実験が遅れており、必要物品の購入がそれに伴い遅れてしまった。次年度の試薬購入に充てる予定である。