2016 Fiscal Year Research-status Report
着床不全症例における子宮内膜への低反応レベルレーザーの効果と機序に関する研究
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16K11094
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| Research Institution | Oita University |
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Principal Investigator |
河野 康志 大分大学, 医学部, 准教授 (40274758)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奈須 家栄 大分大学, 医学部, 教授 (30274757)
楢原 久司 大分大学, 医学部, 教授 (60211447)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 子宮内膜 / 低反応レーザー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
低反応レーザーによる子宮内膜の反応を検討するために、まず、子宮内膜間質細胞の脱落膜化を介する生理活性物質の産生調節に注目し、脱落膜において細胞自身がどのような反応を引き起こすか、さらにこれらの現象が妊娠維持や流産および不育症などの生殖現象にどのように関わっているかを調べる目的で検討を行った。
子宮内膜間質細胞を分離、培養し、Confluent状態を確認後、dibutyrl(db)-cAMPとmedoroxyprogesterone (MPA) で刺激し、脱落膜化を誘導した。脱落膜化は、形態学的に大型で敷石状の脱落膜化細胞の存在やプロラクチンの分泌上昇により確認した。コントロールはdb-cAMP、MPAの添加は行わず同様に培養した。脱落膜化細胞、非脱落膜化細胞においてプロテアーゼ活性化型受容体(PAR)-1 mRNAならびに蛋白の発現において変化を認めた。次に、PAR-1のagonistであるTRAP-6を用い、PAR-1の下流に存在するAktのリン酸化ならびにDNA結合領域を有する転写因子群の一つであるFOXO1の活性についてwestern immunoblot analysisを用い解析した。
TRAP-6を用いたAktの活性では、脱落膜化細胞において添加15分後に強いリン酸化を認めた。また、FOXO1はTRAP-6添加後4時間で強いリン酸化が認められた。
今回の結果から、子宮内膜は脱落膜化することで各種蛋白の産生を調節することが示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
低反応レーザーによる子宮内膜の反応を検討するために、まず、子宮内膜間質細胞の脱落膜化を介する生理活性物質の産生調節に注目し、脱落膜において細胞自身がどのような反応を引き起こすか、さらにこれらの現象が妊娠維持や流産および不育症などの生殖現象にどのように関わっているかを調べる目的で実験を行った。
今回、検体は順調に入手でき、子宮内膜は脱落膜化することで各種蛋白の産生を調節することが示され、仮説通りの実験結果となった。
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| Strategy for Future Research Activity |
子宮内膜間質細胞に対して低反応レーザーを照射し、細胞内情報伝達系に関連したリン酸化酵素を網羅的解析することにより細胞内で特異的に活性化する酵素を解析する。また、子宮内膜間質細胞の脱落膜化に対してどのような影響があるかを検討したい。
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