2016 Fiscal Year Research-status Report
着床面における子宮内膜細胞局所的細胞死の合目的副次効果の解明
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16K11110
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
内田 明花 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (60445236)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
丸山 哲夫 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 准教授 (10209702)
内田 浩 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (90286534)
升田 博隆 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (80317198)
日原 華子 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (80626458)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 着床 / 細胞死 / 細胞運動 / 子宮内膜上皮細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
生殖医療で最大の障壁となっているのが機序に不明な点の多い着床である。子宮内膜上皮細胞層が着床点において細胞死に陥り胚の通過ルートを形成することが知られているが、胚を回避する遠心性の子宮内膜上皮細胞運動よりも効率が悪い細胞死機序を選択していることには、胚の通過ルート形成以外の生理学的意義も持つためと想像している。すなわち、細胞死をトリガーとした、それ以後の着床にとって合目的な細胞動態の機構解明を本研究の目的としている。
平成28年度は、「細胞死による破綻子宮内膜上皮細胞成分の回収および同成分による子宮内膜上皮細胞への影響の解析」を目標とし、子宮内膜上皮細胞モデルIshikawaに対して細胞死を誘導する方法の確立および、細胞死誘導後のIshikawa細胞内容の回収法の確立を目指した。
その結果、「細胞死によって破綻した子宮内膜上皮細胞の細胞内容の漏出（endometrial epithelial cell contents splashed by apoptosis; apoptotic EECC）」を用いて、各種実験系へ展開できる状況が整った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
子宮内膜上皮細胞死を誘導する方法の確立において、細胞死を惹起するFas-FasLシグナルを利用するためのanti-Fas Ab coated polystylene beadsの作出を行った。既報のものは径 3.0 μmの微小パーティクルであったが、本研究においては胚からの細胞死シグナルが子宮内膜上皮細胞に対して引き起こす減少を検討することを目的としているため、ビーズ径を胚サイズの 100.0μmとした。サイズ径の違いのためか、anti-Fas抗体でのコーティングに難航し、FasR刺激性および阻害性の両抗体でのコーティング完成までに時を要した。
細胞死由来子宮内膜細胞内容の回収法においては、conditioned medium 回収、スクレイパーによる機械的回収は速やかに実施できたが、ソニケーターによる超音波破砕の条件設定にも手間取った。
以上の理由から、当初平成28年度内に遂行予定であった、細胞死由来子宮内膜細胞内容による、子宮内膜上皮細胞の細胞運動、細胞増殖の機能解析が実施できていないため、進捗を「遅れている」とした
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞死由来子宮内膜細胞内容の回収に目処がたったため、平成29年度は、前年度に実施できなかった、子宮内膜状細胞の細胞運動、細胞増殖の機能解析をはじめに行うこととしている。
前年度の遅れを取り戻すために、平成29年度は「細胞死による破綻子宮内膜上皮細胞成分による子宮内膜間質細胞への影響の解析」を目的として、細胞外基質を分解するMMPsの産生解析を行ったのちに、子宮内膜間質細胞への細胞死由来子宮内膜上皮細胞内容による細胞運動、細胞増殖機能への影響を検討する予定であったが、子宮内膜間質細胞への同解析を前倒しし、子宮内膜状細胞の細胞運動、細胞増殖機能への影響検討と同時に実施することを予定している。
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| Causes of Carryover |
現在までの進捗状況に記載したの理由で平成28年度中に計画していた、子宮内膜上皮細胞の機能解析が滞っていたために次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成29年度に前年度未実施分の計画はとりやめずに遂行する予定であるので、それらの細胞機能解析に使用する。
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