2017 Fiscal Year Research-status Report
子宮体癌におけるイトラコナゾールの抗腫瘍効果解析及びレスポンダーの同定
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16K11166
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
鍔本 浩志 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (80340975)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 佳代 兵庫医科大学, 医学部, その他 (80594754)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | repositioning / repurposing / anticancer |
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| Outline of Annual Research Achievements |
5種類の子宮体癌細胞株(SNG-II、 HEC-50B、Ishikawa, HEC-1A, AN3-CA)を用いてイトラコナゾールによる増殖抑制実験を行い、cDNA microarray を用いて各細胞株でのシグナル伝達系の変調を検討した。【MTT assay】子宮体癌由来細胞株を培養し、ジメチルホルムアミドで10-２Mとなるように溶解したイトラコナゾール(ITCZ)を最終濃度0.5, 1, 2, 5, 10 μMで調整、各濃度のITCZ添加培養液で癌細胞株を培養し、24～96時間まで経時的に細胞を回収し、MTT Cell Proliferation Assay Kit (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA)を用いて、570nmの吸光度計で生細胞数を計測した。HEC\1A、AN3-CAが著明に細胞増殖が押させられた。これらをresponderとして、その他のnon-responderとをマイクロアレイ解析で比較した。複数の子宮体癌細胞株をITCZ 10μM及びジメチルホルムアミド(vehicle)で72時間培養しmRNAを抽出し、発現遺伝子の変化をSurePrint G3 Human Gene Expression 8×60K v2 Microarray Kit (Agilent Technologies, Tokyo, Japan)を用いて網羅的に測定し、Ingenuity iReport (Tomy Digital Biology, Tokyo, Japan)を用いて解析した。これまで報告されている、ヘッジホッグシグナル伝達経路への作用についてresponderにmRNA発現変化は認めなかった。次にヘッジホッグシグナル伝達経路、オートファジーへの作用、上皮間葉移行への作用をWestern blotsで検討したところ、responderはAKT/ｍTORを介する抑制が示唆された。以上について下記に論文化した。Tsubamoto H, Inoue K, et al. Itraconazole Inhibits AKT/mTOR Signaling and Proliferation in Endometrial Cancer Cells. Anticancer Res. 2017;37(2):515-519.
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
下記に論文化した。Tsubamoto H, Inoue K, et al. Itraconazole Inhibits AKT/mTOR Signaling and Proliferation in Endometrial Cancer Cells. Anticancer Res. 2017;37(2):515-519.また、Window of opportunity 臨床試験を、平成27年8月から実施し着実に症例集積を行っており、2～4週間のITCZ投与前後で得られた組織を凍結、パラフィン包埋保存し、末梢血からDNA及びRNAを抽出保存している。
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| Strategy for Future Research Activity |
Window of opportunity 臨床試験で症例集積された臨床情報と、ITCZ投与前後で得られた凍結保存された組織、前後で末梢血から抽出されたRNAを用いて、ヒト組織における新規作用機序の解明と、liquid biopsyによるバイオマーカーの探索を行う。
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| Causes of Carryover |
今年度行った実験に対する物品費が予定よりも安価であったため、次年度において実験に必要な消耗品の購入に使用する。
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Research Products
(2 results)
