2019 Fiscal Year Annual Research Report
L1CAM-ILK-YAP mechanotransduction drives proliferative activity of epithelial cells in middle ear cholesteatoma.
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16K11186
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
福田 智美 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (40372776)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | YAP / ILK / L1CAM / 中耳真珠腫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
中耳真珠腫は、骨破壊・脳膿瘍などの致命的な合併症を起こす難治性慢性増殖性疾患で、増殖能が更新した重層扁平上皮と厚い皮下組織を特徴とする。真珠腫の発症機序として中耳調圧機構の破綻を誘因とした中耳腔陰圧による鼓膜陥凹、上皮増殖が報告されており、メカノストレス誘導性YAP/TAZによる細胞分化抑制増殖誘導機構の関与が示唆できる。
１．動物モデル(中耳陰圧モデル)での解析：動物モデル解析では、機械的中耳陰圧モデル（Akiyama N, Yamamoto-Fukuda T et al, 2014）を用い、メカノセンシングの関与を検討する目的でHippoシグナル因子であるYAPの核内移行およびその共役因子であるILK発現について抗YAP抗体、抗ILK抗体を用いて免疫組織学的に評価した。結果、陰圧をかけた鼓膜弛緩部では鼓膜の肥厚を認め、同部位の細胞においてILKの発現上昇とYAPの核内移行が認められた。ILK活性因子としてL1CAMが同定できた。
２．vivo実験にてストレッチアッセイを行った。結果、圧負荷群ではYAPの核内移行およびその共役因子であるILK細胞質発現の有意な上昇を認めた。ILK活性因子としてL1CAMリコンビナント蛋白を投与し、圧負荷を与えると細胞増殖活性の上昇を認めた。
３．ヒト真珠腫組織でのメカノセンシング、Hippo シグナルYAP/TAZ発現解析：手術時に採取した中耳真珠腫組織・慢性中耳炎組織・正常皮膚を用い解析をおこなった。結果、ヒト中耳真珠腫でも有意なILKの発現上昇とYAPの核内移行を認めた。またILK活性因子であるL1CAMの発現上昇とYAPの核内移行上昇が認め、L1CAM陽性細胞率と上皮細胞増殖活性との相関を認めた。L1CAM発現細胞と上皮細胞間の距離を計測したところ、上皮細胞増殖活性との相関を認めた。
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