中咽頭癌発癌における口腔内マイクロバイオームの関与

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K11242
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 高橋 秀聡 横浜市立大学, 医学研究科, 客員研究員 (50727196)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐野 大佑 横浜市立大学, 医学部, 講師 (10620990)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 中咽頭癌 / マイクロバイオーム / HPV関連中咽頭癌

Outline of Annual Research Achievements

この研究は、ヒト乳頭腫ウイルス(HPV)関連中咽頭癌の発癌における、口腔内マイクロバイオームの関与を検討することを目的としている。
方法として①HPV感染のある中咽頭癌(HPV関連中咽頭癌)群、②HPV感染のない中咽頭癌(従来型中咽頭癌)群、③非患者群に対して口腔内の菌叢構造解析（メタ16S解析・メタゲノム解析）を行い、群での口腔内マイクロバイオームの系統組成とその機能組成を比較を行う。
しかしHPVの検出方法は標準化されたものはなく，また基準値に関してもさまざまな報告がある。その為、まずは対象となる中咽頭癌患者をHPV関連中咽頭癌群とHPV感染のない従来型中咽頭癌群に分類するために施行するHPV DNAのin situ hybridizationとp16INKaの免疫組織化学染色の手順・所見を過去の症例を用いて検討した。p16INKaの免疫組織化学染色の陽性の基準は70%以上と設定した。その結果、過去の中咽頭癌症例91例中、p16INKaの免疫組織化学染色で陽性は40症例であった。従来の報告どおり、HPV DNAのin situ hybridizationは特異度は高く、感度が低い、p16INKaの免疫組織化学染色は感度は高いが特異度は低い結果であった。
以上の結果より検討する群として、HPV関連中咽頭癌(HPV DNA陽性かつp16INKa陽性(70%以上))、従来型中咽頭癌(HPV DNA陰性かつp16INKa陰性(70%以下))とし，検討することとした。
また、上記基準に相当する患者の唾液の採取を現在継続して行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

疾患群の検体が解析に必要と考えられる数に達しておらず、口腔内の菌叢構造解析が実施できていないため。

Strategy for Future Research Activity

口腔内の菌叢構造解析に必要な検体数の唾液の採取が完了次第、メタ16S解析，メタゲノム解析を行う。採取の進捗状況が芳しくない場合，検体数を減らすことを検討する。

Causes of Carryover

実験計画に遅れがあり、口腔内の菌叢構造解析が行えていないため、次年度使用額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

検体数が揃い次第、口腔内の菌叢構造解析を行い使用する。