疾患特異的歯髄幹細胞を用いたヒルシュスプルング病モデル腸管の作製及び機能解析

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K11346
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 伊崎 智子 九州大学, 大学病院, その他 (90423491)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田口 智章 九州大学, 医学研究院, 教授 (20197247) ; 吉丸 耕一朗 九州大学, 大学病院, 助教 (60711190) ; 岩中 剛 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (70741198) [Withdrawn]
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 脱落乳歯由来歯髄幹細胞 / ヒルシュスプルング病 / ヒルシュスプルング病関連腸炎 / SHED

Outline of Annual Research Achievements

ヒルシュスプルング病は先天的に腸管の神経節細胞が欠如するために腸管蠕動不全をきたし腸閉塞症状を呈する疾患である。発症に関 与する遺伝子として、Ret遺伝子やエンドセリンレセプター遺伝子、エンドセリン3遺伝子などの異常が知られている。しかし単一遺伝 子異常だけでは説明できず、多因子遺伝によると考えられている。 無神経節領域腸管を切除し正常腸管を肛門にひきおろすことで、根治とされるが、術後も残存腸管に腸炎をおこしやすく、時には致命 的となりうる。腸炎を発症するヒルシュスプルング病モデルマウスにおいて、腸管炎症は胸腺縮小、脾臓のリンパ球減少、Bリンパ球 酸性抑制などが観察されおり、腸管粘膜上での炎症のメカニズムについては、IgM,IgA J chain産生プラズマ細胞やCD57陽性natural k iller細胞が炎症を起こした摘出腸管の固有筋層で観察される。このことから局所的、全身的な免疫系の異常も伴い腸炎が発生すると 考えられるが、腸管粘膜上での分子生物学的な炎症の機序については完全には解明されていない。 歯髄幹細胞は脱落した乳歯の歯髄から得られる多能性幹細胞であり、細胞増殖能が高く、遺伝子導入をせずとも入手しやすいソースで あると考えられる。遺伝子レベルでの異常があれば幹細胞もその性質を受け継いでいると考えられることから、ヒルシュスプルング病 患者の遺伝的バックグラウンドを持った類似的腸管モデルを作製することが可能ではないかと推察している。
今年度もヒルシュスプルング病患児でちょうど乳歯が脱落する時期の患児が少なく、また、脱落乳歯の提供を申し出ていただけた児もいたが、持参方法が十分に伝わっておらず、幹細胞が回収できなかった。
今後も引き続き、乳歯の提供を呼びかける予定である。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

予定としていた脱落乳歯がなかなか提供していただけない状況であり、遅延している。脱落乳歯の提供を申し出ていただけた児もいたが、脱落しなかったり、運搬方法に問題があり幹細胞が回収できなかった。

Strategy for Future Research Activity

乳歯が脱落しうる年齢のヒルシュスプルング病患者を外来で経過観察していると考えられる関連病院小児外科などと協力を仰ぎ、当該患者を紹介していただき脱落乳歯の提供をお願いし、研究にたいして協力をいただく。

Causes of Carryover

当該年度は培養系を実際に動かしておらず、使用を予定していた試薬、培養液、実験器材などの消耗品代は大幅に使用が少なかった。また、細胞保存にかかる維持費等も発生しない。
(使用計画) ヒルシュスプルング病患児の脱落乳歯が入手できた場合、歯髄幹細胞の抽出、培養、保存、その後の腸管への分化誘導を進める予定で あるので、平成28年度に使用しなかった物品費などをそのまま活用する。 また、ヒルシュスプルング病の臨床研究を聴講し、ヒルシュスプルング病関連腸炎に関しての最新の知見を獲得するために学会参加を 予定している。