2017 Fiscal Year Research-status Report
動静脈奇形における新生血管の分子制御機構 ～病的血管はいかに新生するか？～
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16K11365
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
野村 正 神戸大学, 医学部附属病院, 特命講師 (30529566)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺師 浩人 神戸大学, 医学部附属病院, 教授 (80217421)
橋川 和信 神戸大学, 医学部附属病院, 准教授 (90403237)
榊原 俊介 神戸大学, 医学研究科, 医学研究員 (50444592)
高須 啓之 神戸大学, 医学研究科, 医学研究員 (40566022)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 血管奇形 / 動静脈奇形 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
血管奇形は先天性の血管性病変であり、特に動静脈奇形（AVM）は軟部組織の醜状変形にとどまらず筋骨格系の変形、病変からの大量出血など組織を破壊することもあり、日常生活に著しい制限を昌実。病変の多くは進行性であり、難治病変では進行を止める手段さえもない場合がある。AVMを含む血管奇形の病態生理および悪化の機序には不明な点が多い。われわれは本研究を通じて、血管奇形における新生血管の形成過程について、１．幹細胞の有無、２．Angiopoietin(Ang)の関与、３．機械的刺激の関与の3つに焦点を当てて分子生物学的側面より評価し、本疾患の分類・診断基準作成の補助ならびに疾患遅漏の確立へ結びつけることを目的とした。われわれはこれまでの研究で、AVM由来の血管内皮細胞の増殖能が正常動脈に比べて明らかに高いという実験結果を得た。この理由の一つに未分化な細胞が正常動脈より多く存在することが推察される。臍帯血には造血幹細胞以外に間葉系細胞ののmesencymal stem cell(MSC)や血管内皮前駆細胞といった幹細胞や前駆細胞が存在することが明らかとなっている。そこで、血管奇形に対して種々のMSCマーカーに関する検討を行う。またAngのうちAng1は血管内皮細胞と壁細胞の安定化を促す。一方、組織が低酸素状態にさらされるとAng2が内皮細胞と壁細胞の接着を抑制することで、内皮細胞が誘導され血管新生へと導く。体表のAVMにおけるAngの関与を分子生物学的に検討する。
AVM悪化の機序として、外傷や不適切な部分切除が指摘されている。何らかの機械的刺激が、血管内皮細胞の発芽を通じて血管新生を生じる可能性が十分に考えられる。還流培養でシェアストレスを変化させて細胞形態の変化やsprouting assayによる血管内皮細胞の発芽の程度を検討する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
増殖因子の検討に動静脈奇形由来血管内皮細胞（AVMVEC）を単離培養し、mRNAを抽出した。正常動脈由来血管内皮細胞（NAVEC)を含めてマイクロアレイで網羅的に検討したところ、複数のサイトカインで両者に著明な差を認めた。その中でもSELPは免疫組織学的検討でもAVMで有意な差を示した。
還流培養では、HUVECを用いて培養液の還流速度や細胞数など至適条件設定を行っている。
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| Strategy for Future Research Activity |
上述のマイクロアレイで網羅的検討を行った増殖因子（特にSELP)に関して、リアルタイムPCRならびにウエスタンブロッティングで発現を検討する予定である。
また、還流培養においても増殖因子の発現を検討する。
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| Causes of Carryover |
（理由）手術で得られた標本が予想より少なく、細胞培養のコストが当初計画より少なくなった。また研究者自身が主に実験する機会が多く、人件費の拠出が少なかった。学術集会の開催都市が大阪のため、旅費の拠出がなかった。
（使用計画）次年度では、細胞培養に加えで免疫組織学的検討に必要な試薬の購入で予算が必要である。また国際学会に演題登録しており、旅費の拠出も見込まれる。
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