2016 Fiscal Year Research-status Report
歯周病関連細菌の外膜蛋白質の糖鎖修飾に関与する酵素の探索と機能の解明
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16K11464
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| Research Institution | Asahi University |
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Principal Investigator |
村上 幸孝 朝日大学, 歯学部, 教授 (60239506)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
猪俣 恵 朝日大学, 歯学部, 講師 (40553798)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 歯周病関連細菌 / 外膜蛋白質 / 糖鎖修飾 / 酵素 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯周病関連細菌のPorphyromonas gingivalisを用いて、これまでに糖鎖修飾された蛋白質を網羅的に検出して同定を行ってきた。その結果、外膜蛋白質にも糖蛋白質が存在することを明らかにしている。主要外膜蛋白質であるOmpA様蛋白質の修飾糖鎖としてN-アセチルグルコサミン、シアル酸やその他の糖を検出している。しかしながら、これらの糖の付加に関わる糖鎖修飾機構については、いまだによく分かっていない。そこで本研究では、糖蛋白質の糖鎖修飾に関わる糖転移酵素を探索し、その機能を明らかにすることを目的とする。選定した糖転移酵素の変異株を作製し、その後、菌体に及ぼす影響の検討を行う。また、宿主に対する病原性への影響も検討して、糖転移酵素の生物学的な意義を追究する。
今年度は、歯周病関連細菌として重要であるP. gingivalisおよびTannerella forsythiaの糖転移酵素をデータベースから検索を行った。特に、N-アセチルグルコサミン転移酵素とシアル酸転移酵素に注目した。N-アセチルグルコサミン転移酵素については、すでに他の細菌において報告のあるものとの相同性を示す酵素の候補を数個見つけることができた。一方、シアル酸転移酵素については、他菌で報告されているものとの相同性が高いものは見つけることができなかったため、別の酵素で代替している可能性があると考えている。また、N-アセチルグルコサミン転移酵素とシアル酸転移酵素のそれぞれに対する阻害剤を用いて、菌体の増殖への影響や菌体蛋白質の糖鎖修飾の変化についての検討も合わせて行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
歯周病関連細菌のP. gingivalisおよびT. forsythiaの糖転移酵素の探索は行ったものの、糖転移酵素の変異株の作製までには至らなかったためである。
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| Strategy for Future Research Activity |
糖転移酵素の変異株の作製を行い、次いで糖鎖修飾の変化や菌の性状の変化の検討を進めて、計画の遅れを取り戻すようにする。
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| Causes of Carryover |
研究初年度であるため、意図的に使い切ることを行わなかったことによる。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度に試薬等の消耗品を購入する予定で使用計画を立てている。
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