2017 Fiscal Year Research-status Report
歯根端切除後の周囲組織の治癒を促す神経ペプチドの同定
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16K11556
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
橋口 勇 九州大学, 歯学研究院, 准助教 (10150476)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前田 英史 九州大学, 歯学研究院, 教授 (10284514)
濱野 さゆり 九州大学, 歯学研究院, 助教 (40757978)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 歯根切除 / 神経線維 / 歯根膜 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度行ったＣＧＲＰ陽性神経線維の分布は前年度に行ったPGP9.5陽性神経線維と同様であった。歯根端切除３日では、窩洞形成時に破折したと思われる象牙質が歯根断端を被覆しており、その近傍の歯髄組織では歯冠側よりの歯髄内に比べてＰＣＮＡ陽性細胞が多く存在していた。骨窩洞には骨窩洞作成時に生じた歯槽骨や象牙質の削片周囲を取り囲むように肉芽組織が認められた。周囲の肉芽組織内にはラミニン陽性の筒状の構造物が多くみられ、また、ＰＣＮＡ陽性細胞が数多く出現していた。神経線維は骨窩洞の下方より発芽しており、骨窩洞に向けて伸長していたが、骨窩洞周囲の肉芽組織中には認められなかった。処置後５日では、歯根断端を被覆している破折象牙質の周囲には既存の歯根膜由来と思われるやや立方形の細胞が散在性に認められた。歯槽骨や象牙質削片周囲にもラミニン陽性の筒状の構造物が出現しており、また、多核の破骨細胞や破歯細胞も観察された。骨窩洞内はほぼ肉芽組織で満たされており、ＰＣＮＡ陽性細胞が数多く出現していたが、CGRP陽性神経線維は骨窩洞の中央部には観察されず、肉芽組織の周囲に分岐していた。処置後１週では、骨窩洞内には幼弱な骨組織が形成されており、歯根断端との間に繊維成分の少ない結合組織が観察された。ラミニン陽性の筒状構造物は骨窩洞内の新生骨組織中にはほとんど見られず、新生骨組織と既存の歯槽骨あるいは歯根周囲の歯根膜組織や新生結合組織中に多くみられた。同様に、神経線維も新生骨を迂回するように伸長していた。ＰＣＮＡ陽性細胞は歯根断端周囲の歯根膜や新生結合組織中で数が増加していた。これらの結果から、CGRP陽性神経線維の直接的な関与については不明であった。ヒト歯根膜由来の細胞を用いてCGRPのレセプター（CGRPレセプター１、CGRPレセプター２）の有無を免疫染色で検討したが、レセプターは観察されなかった
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
前年度は神経線維のマーカーとしてPGP9.5を用いたが、本年度は骨組織形成や組織修復に関与していると言われるCGRPを神経線維のマーカーとして用いた。しかし、前年度と同様に神経線維と骨形成や組織修復との間の時間的ならびに空間的な相関を得ることができなかった。また、今回用いたヒト歯根膜細胞でCGRPレセプターの発現を認めることができなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
神経ペプチドの中でCGRP と同様に骨形成に関与していることが報告されているSubstance P(SP)を神経線維のマーカーとして、歯根端切除後の神経線維の分布と組織修復との時間・空間的な関連を追及すると共に、in vitroの系でヒト歯根膜細胞にSPを添加し、骨芽細胞のマーカーであるオステオポンチン、オステオネクチンやオステオカルシンといった骨芽細胞関連蛋白の発現について検討を加える。
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| Causes of Carryover |
理由：歯根端切除後早期に観察を行い、また、骨代謝に関与するＣＧＲＰ陽性神経線維に絞って局在を観察したが、骨形成や組織修復との間に時間・空間的な関連は見つけることができなかった。in vitroの系ではヒト歯根膜細胞にＣＧＲＰレセプターの発現を観察できなかったので、実験計画のみなおしを行ったため、試薬や動物の購入を見合わせたことが原因である。
使用計画
骨代謝に関連することが報告されているＳＰ陽性神経線維と骨形成・組織修復との関連について検討を加えるとともに、in vitroの系でもＳＰを主体に骨芽細胞のマーカーであるオステオポンチン、オステオネクチンやオステオカルシンといった骨芽細胞関連蛋白の発現について検討を加える。
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