2018 Fiscal Year Annual Research Report
Development and application of root caries model using polymicrobial biofilm
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16K11567
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| Research Institution | Kanagawa Dental College |
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Principal Investigator |
向井 義晴 神奈川歯科大学, 大学院歯学研究科, 教授 (40247317)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浜田 信城 神奈川歯科大学, 大学院歯学研究科, 教授 (20247315)
富山 潔 神奈川歯科大学, 大学院歯学研究科, 准教授 (90237131)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | バイオフィルム / 根面齲蝕 / 細菌叢 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
in vitroで作製した多菌種バイオフィルムの細菌叢が培養期間やスクロース供給の条件によりどのように変化するかを検討した. バイオフィルム形成はExterkateらの方法に従った．刺激唾液をunBuffered McBain（0.2% sucrose含有）培養液に加え10時間培養後，唾液非含有培養液を用いて96時間まで嫌気培養を行った（cont群）．その後，sucrose含有培養液（A群），非含有培養液（B群）を用いて192時間まで培養を行った．A群のバイオフィルムはさらにsucrose含有培養液で288時間まで培養を行った（C群）．B群のバイオフィルムはsucrose含有培養液（D群）と非含有培養液（E群）を用いてさらに288時間まで培養した．各試料の全細菌数を realtime-PCR法により分析し, サンプル由来の16S rDNAから次世代シークエンサーを用いてバイオフィルム構造を分析した．C，D およびA群の全細菌数は他群に比較して高く，E群は顕著に低かった．cont，AおよびC群において，菌叢の90％以上をS. salivariusが占めた．B群ではGranulicatella属、D群ではVeillonella属の割合が顕著に増加し，その他の群ではStreptococcus属が主に菌叢を構成していた．スクロース供給の有無はバイオフィルム菌叢に影響を与え，周辺環境と菌叢の関連性を検討することにより根面齲蝕モデルの培養条件を設定できることが示された.本研究結果はAmerican Journal of Dentistryに投稿中である．また，本モデルを利用した根面齲蝕予防策の一環として，バイオフィルム細菌叢に与える多種イオン徐放性フィラー溶出液の効果も検討し，S-PRGフィラー溶出液がinitial colonizerである菌属を効果的に抑制することが示された。
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