4NQO誘発ラット舌癌モデルにおけるPD-1/PD-L1経路の解析

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K11681
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 米本 和弘 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (80422731)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 柴田 敏之 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 教授 (50226172) ; 牧田 浩樹 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 講師 (50345790) [Withdrawn]
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 4NQO舌癌ラットモデル / PDーL１

Outline of Annual Research Achievements

分子生物学の発展により「がん免疫逃避機構」の存在が明らかとなり、その機構の一つであるPD-1/PD-L1経路が注目されている。H27年9月に悪性黒色腫に対する新しいがんの治療薬である抗PD-1抗体nivolumabが国内で発売開始となり、その治療効果が期待されるところであるが、口腔癌に対する免疫治療薬の開発も望まれるところである。しかし、口腔発がんにおけるPD-1/PD-L1経路の詳細については依然不明なところもあるため、本研究では、口腔癌動物モデルとして頻用されている４-ニトロキノリン１-オキサイド（4NQO）誘発ラット舌発癌モデルを用いてPD-L1の異常発現とその機構について解析し、口腔発癌モデルとしての有用性を検証する。よって、研究期間内に4NQO誘発ラット舌癌モデルを用いて、発癌過程（正常粘膜、軽度異型粘膜～高度異型粘膜、乳頭腫）から癌（早期癌、浸潤癌）におけるPD-L1の発現異常とその推移について明らかにすることを目的とした。
28年度に作成した4-NQO誘発ラット舌癌モデルを犠牲死し採取した舌組織を用いて,H・E染色を行い、組織型の分類（正常粘膜、過形成粘膜、異形成粘膜［軽度・中等度・高度］、乳頭腫、早期癌、浸潤癌）を行い、更に抗PD-L1/CD274(Anti PD-L1/CD274 antibody)抗体を用いて免疫染色を行なった。本年度はウエスタンブロット法によるタンパクの発現について解析を行い、免疫染色の結果と対比させることにより、発癌過程における発現異常の推移について解析をすると共に、PD-1/PD-L1経路の発癌への関与を明らかする。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本年度のおいては、病理組織別に免疫染色法、ウエスタンブロット法により、タンパクのレベルでのPD-L1の発現量を定量化し対比することにより、発癌過程における発現異常の推移について解析をすると共に、PD-1/PD-L1経路の発癌への関与を明らかする。これらにより、動物発癌モデルとしての有用性について評価・検討する予定であったが、ウエスタンブロット法による解析が予定よりやや遅れてる。

Strategy for Future Research Activity

ウエスタンブロット法によるPD-L1のタンパク発現量を解析し、免疫染色法と退避させ本年度中に解析を行なっていく。

Causes of Carryover

研究が予定通り進行せず、遅れている。使用を予定していた試薬が本年度中に購入できなかった。