Analysis of NR4A2-associated mechanism of anti-cancer drug resistance in salivary gland cancer stem cells.

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K11684
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 石岡 康希 広島大学, 病院(歯), 歯科診療医 (70770840)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小野 重弘 広島大学, 医歯薬保健学研究科(歯), 助教 (70379882) ; 重石 英生 広島大学, 医歯薬保健学研究科(歯), 講師 (90397943)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 唾液腺癌 / NR4A2

Outline of Annual Research Achievements

(1)唾液腺癌幹細胞におけるアポトーシス抵抗性の検討: 唾液腺癌細胞を用いて、FACS解析によりCD44high/ESAlow 細胞、CD44high/ESAhigh細胞、CD44low 細胞をそれぞれsortingした。CD44high/ESAlow細胞、CD44high/ESAhigh細胞、CD44low細胞において、AnnexinVを用いて、5-FUにより誘導されるアポトーシス細胞を検出した。その結果、CD44high/ESAlow細胞は最も高いアポトーシス抵抗性を示し、またCD44high/ESAhigh細胞のアポトーシス抵抗性は外因性のPGE2により増加した。CD44high/ESAhigh細胞におけるNR4A2発現を検討したところ、蛍光免疫染色にてNR4A2は核内に発現を認めた。さらに、PGE2添加によってNR4A2のmRNA発現は増加し、PKA inhibitorの添加により、NR4A2 mRNA発現は減少した。以上の結果から、CD44high/ESAhigh細胞のNR4A2の発現にはPGE2が関与していることが示唆された。CD44high唾液腺癌細胞では、NR4A2 siRNAノックダウン後、5-FUにより誘導されるアポトーシス細胞の割合は増加した。このことから、NR4A2がCD44high唾液腺癌細胞のアポトーシス抵抗性に関与している可能性が示唆された。
(2) 内因性PGE2が5-FUにより誘導されるアポトーシスに及ぼす影響: CD44high/ESAlow細胞は高いPGE2産生能を示し、共培養実験の結果、CD44high/ESAlow細胞が産生するPGE2が、CD44high/ESAhigh細胞の5-FUにより誘導されるアポトーシスの抵抗性に関与している可能性が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] CD44high/ESAlow squamous cell carcinoma cell-derived prostaglandin E2 confers resistance to 5-fluorouracil-induced apoptosis in CD44high/ESAhigh cells (2018)
  • Author(s): Shigeishi H, Hashikata M, Yokoyama S, Sakuma M, Murozumi H, Kato H, Rahman MZ, Seino S, Ishioka Y, Ohta K, Takechi M, Sugiyama M
  • Journal Title: International Journal of Clinical and Experimental Pathology Volume: 11 Pages: 2356-2363
  • Peer Reviewed / Open Access