2017 Fiscal Year Research-status Report
| Project/Area Number |
16K11700
|
|---|
| Research Institution | Tokyo Medical University |
|---|
Principal Investigator |
古賀 陽子 東京医科大学, 医学部, 講師 (10392408)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
近津 大地 東京医科大学, 医学部, 教授 (30343122)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | 歯髄幹細胞 / 骨芽細胞誘導 / 三次元的骨再生 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
【目的】研究代表者らがこれまでに見出してきた骨形成シグナルに関する基礎的知見と骨形成低分子化合物群に関する知識を集約させ、さらに発展・融合させることで、我々の日常診療において遭遇する抜去歯からのヒト歯髄幹細胞をソースとした高効率な骨芽細胞への分化誘導を行い、採取が容易である自家細胞を用いた新たな三次元骨再生医療戦略へとつなげることを本研究の目的とした。
【方法・結果】初年度に引き続き、1．ヒト歯髄幹細胞の高効率・安定的な骨分化法の開発を行った。低分子化合物であるヘリオキサンチン誘導体（TH)を使用することにより高効率な骨分化誘導法を確立した。至適濃度は、10-6Mであり、ｑPCRによりTH添加群においてRunx2, Alp, Colla1, Osteocalcinの発現が有意に上昇することを確認した。2．ヒト歯髄幹細胞由来骨芽細胞の三次元培養法の確立を温度応答性培養皿を用いてシート状培養を行った。3．積層したヒト歯髄幹細胞由来骨芽細胞シートを免疫不全マウスの頭頂骨臨界骨欠損マウスを作成し移植実験を行った。マイクロCT, 骨濃度、密度、およびHE染色、Masson Trichrome染色より、TH添加群で有意な骨形成を認め、その概要を国際英文誌（Stem Cell Res Ther, 2018)に報告した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
計画当初はテトラポット型α-TCP微小人工骨を用いて三次元培養を行う予定だったが、低分子化合物（TH)を用いることで高効率な骨芽細胞誘導法を確立し、シート培養を積層することで三次元培養に成功した。また、免疫不全マウスの頭頂骨臨界骨欠損マウスへの移植実験を行いTH添加群で有意な骨形成能が確認できたため、計画以上に進んでいる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は、これまでの手法を生かして、免疫不全ラットへの応用を目指し、in vivoでの評価を中心に行っていく。
|
| Causes of Carryover |
順調に実験が進んだため概算していた金額より低く済んだ。そのため、次年度のin vivo実験に使用する予定である。
|
