Genomic diagnosis of ameloblastoma by high-resolution array comparative genomic hybridization and development of molecular target drug

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K11711
• Research Institution: Aichi Medical University
• Principal Investigator: 風岡 宜暁 愛知医科大学, 医学部, 教授 (30233696)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山田 陽一 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (20345903) [Withdrawn] ; 太田 明伸 愛知医科大学, 医学部, 講師 (30438048) ; 大野 隆之 愛知医科大学, 医学部, 講師 (20434623) ; シバスンダラン カルナン 愛知医科大学, 医学部, 講師 (30557096)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: エナメル上皮腫 / TLR

Outline of Annual Research Achievements

背景：エナメル上皮腫は、侵襲性の高い歯原性上皮性腫瘍であり、その発生頻度は歯原性腫瘍全体のおよそ半数を占める。エナメル上皮腫におけるゲノム異常の解析は進んだが、増殖・生存・悪性化に関する分子機序には不明な点が多い。本研究では、エナメル上皮腫細胞の分子生物学的特徴を明らかにすることを目的として以下の解析を行った。
方法：8人のエナメル上皮腫患者から得た腫瘍部・非腫瘍部から得た検体を用いて高密度アレイCGH法とcDNAマイクロアレイ法を用いた網羅的解析を行った。また、患者から得た検体から細胞株の樹立を試みた。さらにRNAi法によりTLR2の機能解析を行った。
結果：アレイCGHの結果、腫瘍検体のみに認められる微小な増幅領域と欠損領域の同定に成功した。また、cDNAマイクロアレイ解析の結果、非腫瘍部に比べて腫瘍部において発現量が10倍以上高い遺伝子204個と10倍以上低い遺伝子342個を同定した。次に、樹立したエナメル上皮腫細胞株AMU-AM1における遺伝子発現様式を解析したところ、ある種のToll様受容体（TLR）の高発現が認められた。TLRは自然免疫に関する受容体分子であるが、近年の報告ではがんで発現増加が認められており、がん細胞の性状に与える影響が示唆されている。そこで、TLRの遺伝子発現をノックダウンしたところ、炎症関連遺伝子やがん関連遺伝子の発現が減少した。さらに、Caspase-3の活性が増加した。その一方で、TLRリガンドによる刺激は、AMU-AM1細胞の増殖を促進させる効果は認められなかった。
結論：エナメル上皮腫ではTLRの高発現が認められ、TLRを介したシグナルがエナメル上皮腫細胞の生存に関与する可能性が示唆された。