2017 Fiscal Year Research-status Report
mGluR5特異的経口阻害剤RG7090による口腔癌の転移抑制療法の開発
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16K11731
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| Research Institution | Dokkyo Medical University |
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Principal Investigator |
栗林 伸行 獨協医科大学, 医学部, 助教 (80617332)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木内 誠 獨協医科大学, 医学部, 助教 (00759483)
内田 大亮 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (20335798)
川又 均 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (70224847)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | mGluR5 / CXCR4 / 口腔癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
われわれは、口腔癌細胞がケモカインレセプターCXCR4 を利用し転移することを明らかにした。一方、CXCR4 阻害剤は造血幹細胞の動員薬として米国で臨床応用されており、長期間投与した場合、血球系細胞への影響が危惧される。われわれは血球系細胞に発現していないCXCR4 の標的分子として、metabotropic glutamate receptor (mGluR) 5 を同定し、mGluR5 特異的阻害剤がCXCR4 システム依存的な口腔癌細胞の転移を抑制することを明らかにした(PLoS One 8:e80773, 2013)。しかしながら、用いたmGluR5 阻害剤は連日の腹腔内あるいは静脈内投与を必要とするため、実用的ではない。最近、新規mGluR5 特異的経口阻害剤であるRG7090が開発され、大鬱病障害や脆弱性Ｘ症候群における有用性が報告された。RG7090 は従来のmGluR5 阻害剤に比べ半減期が長く、隔日経口投与が可能であるためmGluR5をより低侵襲かつ持続的に抑制することができる。そこで、本研究では、CXCR4 システムを介した口腔癌の転移に対するmGluR5特異的阻害剤RG7090 の効果を検討することを目的とした。まず、RG7090 がmGluR5 の機能抑制に及ぼす影響をCa flux assayにて検討した。mGluR5 の特異的作動薬であるDHPG((S)-3,5-DHPG) でB88-SDF-1 細胞を刺激すると、早期に細胞内Ca 濃度の上昇を認めた。そこにRG7090 10nMを処理しassayを行い濃度上昇の抑制をやや認めたが、再度濃度を振り分けて有意差の有無を検討している。また、in vivoにおいては動物実験計画書を提出の上、野生型マウス(C3H/HeN)を購入し、RG7090投与下における有害事象の有無を検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
RG7090の in vitroでの測定にて傾向はあるものの有意所見がでないため、濃度調整の再検討を継続している。また、細胞毒性についてはMTT assayにて検証している。
in vivoにおいては野生型マウスを購入し薬剤投与中である。引き続き血球測定器を用いて有害事象を検討していく。
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| Strategy for Future Research Activity |
in vitroではB88-SDF-1細胞におけるRG7090の濃度を再検討し、mGluR5における機能抑制、非足場依存性増殖、細胞遊走、細胞浸潤の役割について検討していく。
また、in vivoにおいて、ヌードマウスを用いてマウスリンパ節転移モデルとして咬筋内同所性移植、肺転移モデルとして静脈内移植を行い、それに対するRG7090が転移抑制に及ぼす影響を検討していく。
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| Causes of Carryover |
使用理由についてはin vitroの実験において、引き続き、足場依存的あるいは非依存的な増殖に及ぼす影響、細胞遊走と細胞浸潤に及ぼす影響を検討する。必要があるため次年度使用額が生じた。
使用計画については、足場非依存性増殖を評価に使用するsoft agar用器材、細胞遊走能の評価に使用するmigration、wound healing、蛍光抗体用の器材、および細胞浸潤能の評価に使用するinvasion 用器材を購入する。さらに、ヌードマウスの購入および、mGluR5阻害剤、口腔癌細胞を購入する。また、研究成果は、上述の学会に出席発表し、国際雑誌にも投稿予定である。
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