口腔扁平上皮癌における分子標的薬耐性メカニズムと対策

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K11732
• Research Institution: Tokai University
• Principal Investigator: 山崎 浩史 東海大学, 医学部, 准教授 (00338708)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森 泰昌 国立研究開発法人国立がん研究センター, 中央病院, 医員 (00296708)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 口腔扁平上皮癌 / 分子標的薬

Outline of Annual Research Achievements

上皮成長因子受容体（EGFR）に特異的に結合する抗体であるセツキシマブ（Cmab）は、局所進行頭頚部扁平上皮癌（HNSCC）の局所制御、生存における上乗せ効果、さらに遠隔転移再発HNSCCに対する生存における上乗せ効果が示されている。EGFRの過剰発現や遺伝子コピー数の増加がHNSCCの予後不良に関係することは知られており、特に放射線療法や化学療法後の予後を予測するうえで重要と考えられている。しかしながら、HNSCCにおけるCmabに対する反応性を予測する指標について、EGFRの発現レベルやコピー数は指標にならないとされ、その原因として、変異型EGFRであるEGFRvariantⅢ（EGFRvⅢ）の存在が指摘されている。野生型EGFR（EGFRwt）に対する抗体であるCmabは、EGFR細胞外ドメインに欠失変異を有するEGFRvⅢへの結合性が低いと考えられ、EGFRvⅢを指標としたネガティブセレクションの可能性が示唆されている。そこで、口腔扁平上皮癌（OSCC）におけるEGFRvⅢの発現を検討した。手術療法を施行したOSCC９６症例を対象とした。定量RT－PCR法でEGFRwtおよびEGFRvⅢを検出した。PCR産物を電気泳動し、EGFRwt、EGFRvⅢ部を切り出し、シークエンス（サンガー法）を行い、塩基配列を確認した。しかし、EGFRvⅢの発現が不安定であるため、デジタルPCRによる検出と次世代シークエンサーによる確認を行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

現在、次世代シークエンサーによる検討の準備を行っており、このためのサンプルの調製に時間を要している。

Strategy for Future Research Activity

サンプルの調製が出来次第、次世代シークエンスを行うことになっている。

Causes of Carryover

本研究の目的のひとつである口腔扁平上皮癌（OSCC）における変異型EGFR（EGFRvⅢ）の発現について検討した結果、OSCCにおいてEGFRvⅢの発現が比較的まれであり、さらに不安定であることがわかった。そこでデジタルPCRと次世代シークエンサーによる精密な検討が必要になった。2018年度内に次世代シークエンサーによる検討を完了する計画であったが、サンプルの調製に時間を要したため2018年度内に完了することが困難となった。そのため次世代シークエンスの委託費が未払いとなり、次年度繰越しとなった。研究計画を1年延長し、2019年度内に次世代シークエンサーによる検討を完了する計画に変更した。