2017 Fiscal Year Research-status Report
機械受容チャネルをターゲットとしたシェーグレン症候群患者の難治性疼痛の解明
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16K11766
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
岡田 明子 日本大学, 歯学部, 准教授 (10434078)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩田 幸一 日本大学, 歯学部, 教授 (60160115)
今村 佳樹 日本大学, 歯学部, 教授 (90176503)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | シェーグレン症候群 / 口腔乾燥 / 舌痛 / Piezo2 / 三叉神経節 / ATP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
唾液腺と涙腺の臓器特異的自己免疫疾患であるシェーグレン症候群患者は、唾液分泌障害が生じているため、口腔乾燥による舌痛に苦しむことがある。本研究では、雄性NFS/sldマウスの生後3日目の胸腺を摘出し、唾液腺・涙腺に限局する自己免疫病変を発症させたシェーグレン症候群類似の病態を呈するシェーグレン症候群モデル（SS 群）を作製した。対照群として胸腺摘出を施さないsham群を作製し、SS群と比較検討することにより、舌痛発症機序の解明を試みた。前年度までの結果より、SS群の唾液量が有意に減少しており、舌の強い乾燥が認められ、SS群の舌に機械的痛覚過敏が生じていることが分かった。機械受容チャネルPiezo2の舌における発現量は、免疫染色を用いた解析では有意差を認めなかった。よって、新たにWestern blot法を用いて舌におけるPiezo2タンパク発現量を詳細に定量したところ、sham群と比較し、SS群で有意に増加していた。またELISA法を用いて唾液中ATP量を定量したところ、SS群で有意に増加していた。そこで新たに次の仮説が考えられた。Piezo2は表皮メルケル細胞に存在していることが分かっているが、非侵害刺激によりPiezo2が刺激され、メルケル細胞からATPが放出され、神経終末に存在するP2X2/3受容体を刺激することにより痛覚過敏が生じるのではないかと考えられた。よって、Piezo2阻害剤であるGsMTx4と、P2X2/3受容体の阻害剤であるA-317491を舌に投与し、舌への機械刺激に対する逃避反射行動閾値を測定したところ、各阻害剤の投与により機械的痛覚過敏が抑制された。また、三叉神経節のP2X2/3量を測定したところ、両群間で有意差はなかった。よって、現在GsMTx4投与後のATP量と舌におけるP2X2/3タンパク量の測定をしているところである。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画通りに研究を施行する中で新たな仮説が示唆された。シェーグレン症候群モデルマウス（SS群）の舌において、非侵害刺激によりPiezo2が刺激され、メルケル細胞からATPが放出されて、神経終末に存在するP2X2/3受容体が刺激されることにより、SS群の舌の痛覚過敏が生じるのではないかと考えられた。そこで、P2X2/3受容体の阻害剤投与による逃避反射行動閾値の変化の観察や三叉神経節のP2X2/3発現量の測定を新たに行った。
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| Strategy for Future Research Activity |
上記の仮説を確かめるため、新たにGsMTx4投与後のATP量と、舌におけるP2X2/3タンパク発現量の測定をWestern blot法とELISA法を用いて完成させたい。そして、計画通りに電気生理学的研究を用いて、両群マウスの三叉神経節におけるPiezo2の機能変化の可能性も確かめたい。両群の三叉神経節より侵害受容性神経細胞の活動電位を記録し、阻害剤であるGsMTx4やA-317491を舌に直接投与して、舌の触刺激に対する活動電位の応答変化を調べる予定である。
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| Causes of Carryover |
（理由）予定していた学会発表をとりやめたため、残金が生じた。
（使用計画）次年度の繰越金は30年度の助成金と合わせて、新規薬品や器具の消耗品、成果発表のための学会参加費、投稿論文の英文校正料並びに論文投稿料を予定している。
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