2018 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of the rule of the parathyroid hormone receptor in alveolar bone and tooth eruption
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16K11815
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
下村 淳子 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 准教授 (00386286)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梨田 智子 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 非常勤講師 (10133464)
中原 賢 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 教授 (20610257)
下村 裕 山口大学, 大学院医学系研究科, 教授 (70397107)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | PTH1R / 点突然変異 / 歯槽骨 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
副甲状腺ホルモン(PTH)・副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)の受容体(以下PTH1R)は骨代謝だけではなく、歯の萌出に重要な役割を持つ。本研究は、Jansen型変異PTH1Rの分子病理，すなわちその誘導シグナリング経路と骨形成系細胞の分化に対する異常について解明するものである。これにより、歯槽骨におけるPTH1Rの作用を解明するとともに、PTH1Rの関与する歯の萌出機構を明らかにすることを目的とする。
平成28年度は、野生型およびJansen型PTH1R cDNAを組み込んだ発現ベクターを用い、その機能をin vitroの実験系にて解析を行った。
平成29年度は、野生型およびJansen型PTH1R cDNAのc末にHAタグを組み込んだものを、DMP1 promoter/enhancer cassetteに組み込んだvectorを構築し、それら２種類のベクターを、それぞれ生後3-4日齢のマウス頭頂骨を切り出し、骨細胞および骨芽細胞系の細胞を分画・培養したprimary cultureにlipofectamin法を用いてtranfectionし、野生型およびJansen型PTH1R vectorの細胞内での発現確認を行うところまでの作業を行った。
平成30年度は、DMP1 promoter/enhancer cassetteに組み込んだvectorを用いて、骨・歯槽骨特異的なJansen型PTH1Rトランスジェニックマウス（以下TGマウス）の作製を行った。TGマウス（胎生18日齢）は、コントロールマウスと比較し、その表現系において四肢の短縮、下顎の後退を認めた。また、マイクロCT画像解析から、特に頭蓋骨縫合部の骨基質の石灰化不全を認めた。さらに組織学的解析から、歯胚周囲歯槽骨の希薄化を認めた。
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