2017 Fiscal Year Research-status Report
ベージュ脂肪細胞の可視化を目指した生体イメージング法の確立と抗肥満成分の探索
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16K12728
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
井原 勇人 和歌山県立医科大学, 共同利用施設, 講師 (00223298)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
向阪 彰 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (00458051)
竹島 健 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (40647517)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ベージュ化脂肪細胞 / 生体イメージング法 / 抗肥満機能成分 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は、サンショウ成分には抗肥満効果があり、高脂肪食による脂肪肝を抑制し、糖・脂質代謝改善効果を有すること、また熱産生タンパクUCP-1をはじめベージュ化に関与する遺伝子発現が亢進することを明らかにしてきた。
ジャクソン・ラボから輸入したThermo Mouse(FVB/N-Tg(Ucp1-luc2, -tdTomato) /1Kajim/J)を繁殖させ、個体識別のために耳パンチをした耳片組織からゲノムDNAを抽出しGenotypeをチェックしたところ、雄のみにUCP-1/ルシフェラーゼ・レポーター遺伝子が導入されていることが判明した。すなわちY染色体に挿入されているということである。これらの事は、トランスジーンの導入マウスはヘテロ体でしか得られないことを意味している。
実験するにあたり、まず寒冷刺激、beta-アドレナリン受容体アゴニスト刺激にて、UCP-1/レポーター遺伝子の発現が上昇するかどうかを確認した。寒冷刺激にて、特に褐色脂肪組織におけるUCP-1/ルシフェラーゼ・レポーター遺伝子発現について検討したところ、９℃で5時間では発現が見られなかったが、16時間でレポーター遺伝子発現が見られた。次に、CL316243について検討したところ、３日間腹腔内投与で同腹の兄弟６匹のうち４匹でレポーター遺伝子発現上昇が見られた。また同複にもかかわらず、１匹は反応が弱く、さらにもう１匹はこれらの刺激を与えなくても、強く発現を示すものも存在した。
次にサンショウ成分を混餌して、８週間に渡りUCP-1/レポーター遺伝子発現を追跡したところ、褐色脂肪組織での発現上昇はほとんどなく、下腹部でのUCP-1/ルシフェラーゼ・レポーター遺伝子発現上昇は見られるものの、これらの組織は鼠径部皮下脂肪ではなかった。それ以外にも、Y染色体に導入されているためか、睾丸そのものでの発現上昇が認められた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
輸入したThermo Mouse （UCP-1/Luciferase レポータートランスジェニックマウス）の輸入に手間取ったため、当初の計画より遅れている。また、Y染色体にトランスジーンが挿入されているためヘテロでオスにしか発現せず、交配により実験に用いる匹数を揃えるのに苦心している。睾丸が非特異的に発光するするため、鼠径部皮下脂肪のベージュ化が分かりにくいという難点がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
上記の問題があるため、新たにトランスジェニックマウスを作成する必要があるものと考えられる。ただ、褐色脂肪組織での発現に関しては、概ね既知の刺激に対する発現パターンが再現されていると考えられるため、褐色脂肪組織でのUCP-1遺伝子発現上昇をさせるもののスクリーニングには使えそうである。
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| Causes of Carryover |
輸入遺伝子改変マウスの到着に時間がかかり、これを用いた実験をする時間があまりなかったため
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[Journal Article] Impact of heart-specific disruption of the circadian clock on systemic glucose metabolism in mice.2017
Author(s)
Nakao, T., Kohsaka, A., Otsuka, T., Thein, ZL., Le, H.T., Waki, H., Gouraud, S.S., Ihara, H, Nakanishi, M., Sato, F., Muragaki, Y, and Maeda, M.
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Journal Title
Chronobiology International (Epub 2017 Dec.22)
Volume: 35 (4)
Pages: 499-510
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Presentation] Heart-specific disruption of Bmal 1 leads to hepatic insulin resistance in mice.2017
Author(s)
Nakao, T., Kohsaka, A., Stuka, T., Le, H.T., Thein, Z.L., Sato, F., Ihara, H., Murasaki, Y., Maeda, M.
Organizer
Experimental Biology 2017 (EB2017)
Int'l Joint Research
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