2017 Fiscal Year Annual Research Report
A feasibility study for 3D neuropathology
| Project/Area Number |
16K14571
|
|---|
| Research Institution | Niigata University |
|---|
Principal Investigator |
柿田 明美 新潟大学, 脳研究所, 教授 (80281012)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北浦 弘樹 新潟大学, 脳研究所, 助教 (80401769)
清水 宏 新潟大学, 脳研究所, 助教 (40608767)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | 神経細胞病理学 / 脳透明化技術 / てんかん |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
てんかん外科病理診断をしていると、“薄切した通常の組織標本の観察では病変を正しく評価できないのではないか”、と思われる症例を少なからず経験する・皮質異形成における軽微な細胞配列の乱れを評価する場合などがこれに当たる。本研究は、最近報告された、脳を透明化する革新的技術を応用し、神経細胞の配列を３次元で捉える新規標本観察法を創出し、てんかん原性脳病巣における病態形成基盤を明らかにすることを目的とした。
内側側頭葉てんかん患者から採取された側頭葉外側新皮質を検索対象とし、以下の研究を実施した。(i) <CUBIC試薬を用いて脳組織の透明化を図る> ヒト脳組織は齧歯類等のそれと比較し、脂質の含有割合が極端に高いなど、従来の透明化試薬では本研究の目的を達成出来ないことが明らかとなった。そこで、数百種類の化学物質を対象に、ヒト脳の透明化に最適なプロトコールを探索した。(ii) <細胞標識方> ヒト脳組織は自家蛍光が極端に強い。そのため、これを完全に除去することは困難であった。そこでこの特徴を逆手にとって、自家蛍光発色構造物を捉え、次いでこれを化学的に消退させる方法を見出した。更に、光学顕微鏡標本で一般的に使用される染色法：HE染色、K-B染色に匹敵する、蛍光一般染色試薬を見出した。これにより、例えばアルツハイマー病の老人斑が可視化できる事が明らかになった。(iii) ＜免疫組織化学染色＞ 透明化後の脳ブロックに免疫組織化学染色を施し、抗体が浸透し、蛍光分子を標識した二次抗体で抗原を可視化出来る条件検定を進めた。
この様にヒト脳組織の新規標本観察法の開発を進めた。本方法論の意義は、てんかん診療上のそれにとどまらない。神経変性疾患や脳腫瘍などを対象とする神経病理学において、イノベーションを創出する可能性のある方法論を創出した。
|
-
-
[Journal Article] Biallelic variants in CNPY3, which encodes an endoplasmic reticulum chaperone, cause early-onset epileptic encephalaopathy.2018
Author(s)
Mutoh H, Kato M, Akita T, Shibata T, Wakamoto H, Ikeda H, Kitaura H, Aoto K, Nakashima M, Wang T, Ohba C, Miyatake S, Miyake N, Kakita A, Miyake K, Fukuda A, Matsumoto N, Saitsu H
-
Journal Title
Am J Hum Genet
Volume: 印刷中
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Intractable epilepsy due to a rosette-forming glioneuronal tumor with dysembryoplastic neuroepithelial background.2018
Author(s)
Sumitomo N, Ishiyama A, Shibuya M, Nakagawa E, Kaneko Y, Takahashi A, Otsuki T, Kakita A, Saito Y, Sato N, Sugai K, Sasaki M
-
Journal Title
Neuropathology
Volume: 印刷中
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Intronic TTTCA and TTTTA repeat expansions in benign adult familial myoclonic epilepsy.2018
Author(s)
Ishiura H, Doi K, Mitsui J, Yoshimura J, Toyoshima Y, Kakita A, Takahashi H, Shirota Y, Kubota A, Ugawa Y, Koh K, Takiyama Y, Ohsawa-Yoshida N, Ishiura S, Kira J, Tamaoka A, Akiyama H, Otsuki T, Sano A, Ikeda A, Goto J, Morishita S, Tsuji S
-
Journal Title
Nat Genet
Volume: 50
Pages: 581-590
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
-
-
[Journal Article] Comprehensive genetic characterizeation of rosette-forming glioneuronal tumors: independent component analysis by tissue microdissection.2018
Author(s)
Kitamura Y, Komori T, Shibuya M, Ohara K, Saito Y, Hayashi S, Sasaki A, Nakagawa E, Tomio R, Kakita A, Nakatsukasa M, Yoshida K, Sasaki H
-
Journal Title
Brain Pathology
Volume: 28
Pages: 87-93
DOI
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Ca2+-permiable AMPA receptors associated with epileptogenesis of hypothalamic hamartoma.2017
Author(s)
Kitaura H, Sonoda M, Teramoto S, Shirozu H, Shimizu H, Kimura M, Masuda H, Ito Y, Takahashi H, Kwak S, Kameyama S, Kakita A
-
Journal Title
Epilepsia
Volume: 58
Pages: e59-e63
DOI
Peer Reviewed
-
[Presentation] MRI病変の指摘がないが機能画像等により焦点切除術を行った小児てんかん患者の臨床的特徴.2018
Author(s)
斎藤良彦, 須貝研司, 竹下絵里, 本橋裕子, 石山昭彦, 齋藤貴志, 小牧宏文, 中川栄二, 佐藤典子, 柿田明美, 齊藤祐子, 大槻泰介, 岩崎真樹, 佐々木征行.
Organizer
第60回 小児神経学会
-
-
[Presentation] Biallelic variants in CNPY3 cause West syndrome with hippocampal malrotation and characteristic fast waves.2018
Author(s)
Kato M, Mutoh H, Akita T, Shibata T, Wakamoto H, Ikeda H, Kitaura H, Aoto K, Nakashima M, Wang T, Ohba C, Miyatake S, Miyake N, Kakita A, Miyake K, Fukuda A, Matsumoto N, Saitsu H.
Organizer
13th European Congress on Epileptology
Int'l Joint Research
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
