2019 Fiscal Year Annual Research Report
in vitro reconstruction system for understanding nuclear structural property
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16K14727
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
原 裕貴 山口大学, 大学院創成科学研究科, 助教(テニュアトラック) (80767913)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 核サイズ / サイズ生物学 / 無細胞再構成系 / クロマチン構造 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
「核の構造的特性」の理解を本研究の目的とし、核内の特徴量に着目した核のサイズの増大速度の制御機構に関する解析を進め、新規制御機構を示す実験的証拠を得ることに成功した。
手法に関しては、これまでに整備した実験環境において、アフリカツメガエル卵抽出液による核のin vitro無細胞再構築系を用い、核の構成材料の供給能力を改善させる実験条件を検討した。さらに、上記無細胞系で培養予定のDNA結合ビーズの調製を試み、調製後のDNA結合ビーズより核のin vitro再構成の実験を進めた。
上記手法の整備・改善と同時に、核のin vitro無細胞再構築系、ならびにライブイメージング法を用いて、核のサイズが増大する制御機構に関する解析も進展させた。これは、核が内包する遺伝情報であるDNAの「量」が核サイズの制御に与える影響に着目したものである。核内DNAの量に実験的摂動を与えた上で、核サイズの増大速度への影響を解析することで、核内のDNA量依存的に核サイズの増大速度を制御する特徴を示すことが出来た。さらに、DNAの物理特性を制御することで、核内クロマチンの構造が核サイズを制御する新規機構を示唆する実験的証拠を得た。これら結果は研究論文として投稿（査読）中であり、先行研究とは異なる観点からの新規の核サイズの制御機構を示した。さらに、生物種横断的に核のサイズや核内特徴量を比較することで、得られた新規制御仮説が真核生物種のみで保存されている新規提案を行った。この種間比較のデータに関しては研究論文として発表することができた。
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Research Products
(7 results)
