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2016 Fiscal Year Research-status Report

複合微生物系と極貧環境下での生育能から環境細菌の実環境での生き様に迫る

Research Project

Project/Area Number 16K14877
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

永田 裕二  東北大学, 生命科学研究科, 教授 (30237531)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 津田 雅孝  東北大学, 生命科学研究科, 教授 (90172022)
大坪 嘉行  東北大学, 生命科学研究科, 准教授 (40342761)
Project Period (FY) 2016-04-01 – 2018-03-31
Keywordsoligotroph / 複合微生物系 / 炭酸固定
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、環境を汚染する難分解性有機塩素系殺虫剤分解細菌株と、その分離源となった分解細菌コミュニティをモデルとして、(1) 分解細菌株と分解能を持たない他細菌株との関係性、(2) 実環境の標準的な条件と考えられる極貧栄養環境下での分解細菌株の生育、の2点に着目し、環境細菌の実環境での「生き様」に関する理解を深め、分解細菌の効果を最大限に発揮するための汚染環境への具体的接種方法の提示など、実環境での環境浄化への応用のための理論的基盤を構築することを目的とする。
これまでのメタゲノム解析によって、本コミュニティは分解菌TKS株と複数種の非分解菌によって構成されていることが明らかとなっている。特にコミュニティ内での存在割合が多かった非分解菌のTKC株とTKP株、および分解菌TKS株を含めた3株の土壌での生残性を調べた結果、TKC株は接種後1週間以内にコロニー形成能を持つ細胞数が増加したが、TKS株とTKP株は徐々に減少し、土壌に定着できなかった。しかし、TKS株はTKC株と混合して滅菌土壌に接種された場合に増殖でき、土壌環境への定着において他者を必要とする場合があることが明らかとなった。また、TKC株は一部の低栄養性培地にて、TKS株と混合して固体培地に接種すると、TKS株コロニーに向かって細胞増殖をすることがわかった。この結果は、TKC株が積極的にTKS株とコミュニティを形成する可能性を示している。
一方、UT26株で観察されたアルコールデヒドロゲナーゼ遺伝子 (adhX) を高発現させると有機炭素源非添加の無機固体培地でCO2の固定を伴ってコロニー形成する現象が、UT26株のみならずTKS株や系統的に離れた細菌株でも観察されることを確認した。また、本現象に特定のアルコール基質がアルデヒドを経て代謝される過程が関与している可能性が低いと考えられる結果が得られた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

コミュニティの構成原理に関しては、分解細菌の土壌への定着に非分解細菌の存在が必要であること、非分解細菌が分解細菌に向かって積極的に細胞増殖をすること、という2つの重要な発見をすることができた。また、有機炭素源非添加の無機固体培地でCO2の固定を伴ってコロニー形成する現象の普遍性を示し、その機構の解明に繋がる結果が得られた。以上、本質的に重要な結果が得られたことから、おおむね順調に研究が進んでいると判断した。

Strategy for Future Research Activity

コミュニティの構成原理に関しては、初年度に発見した分解細菌の土壌への定着に非分解細菌の存在が必要である、非分解細菌が分解細菌に向かって積極的に細胞増殖をするという2つの興味深い現象の分子機構の解明に迫る。そのために、TKC株の全ゲノム配列を決定し、分子遺伝学的手法を用いて関連遺伝子群を明らかにする。一方、有機炭素源非添加の無機固体培地でCO2の固定を伴ってコロニー形成する現象についても、トランスポゾン挿入突然変異株ライブラリーを次世代型シーケンサーで網羅的に解析する手法を用いて関連遺伝子群を明らかにし、その機構解明を目指す。

Causes of Carryover

トランスポゾン突然変異株ライブラリーの作製に時間がかかり、次世代型シーケンサーによる解析に至らなかったため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

トランスポゾン突然変異株ライブラリーの次世代型シーケンサーによる解析の試薬代として用いる。

  • Research Products

    (28 results)

All 2017 2016

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (22 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 1 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Conjugative transfer system of IncP-9 naphthalene-catabolic plasmid NAH7: characterization of its oriT region and relaxase and host range of conjugative system2017

    • Author(s)
      Kishida K, Inoue K, Ohtsubo Y, Nagata Y, Tsuda M
    • Journal Title

      Appl. Environ. Microbiol.

      Volume: 83 Pages: e02359-16

    • DOI

      10.1128/AEM.02359-16

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Efficient N-tailing of blunt DNA ends by Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase2017

    • Author(s)
      Ohtsubo Y, Nagata Y, Tsuda M
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Pages: 41769

    • DOI

      10.1038/srep41769

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Complete genome sequence of Bradyrhizobium diazoefficiens USDA 122, a nitrogen-fixing soybean symbiont2017

    • Author(s)
      Sugawara M, Tsukui T, Kaneko T, Ohtsubo Y, Sato S, Nagata Y, Tsuda M, Mitsui H, Minamisawa K
    • Journal Title

      Genome A.

      Volume: 5 Pages: e01743-16

    • DOI

      10.1128/genomeA.01743-16

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Biodegradation of gamma-hexachlorocyclohexane by transgenic hairy root cultures of Cucurbita moschata that accumulate recombinant bacterial LinA2016

    • Author(s)
      Nanasato, Y., Namiki, S., Ohsima, M., Moriuchi R., Konagaya, K., Seike, N., Otani, T., Nagata, Y., Tsuda, M., Tabei, Y.
    • Journal Title

      Plant Cell Reports

      Volume: 35 Pages: 1963-1974

    • DOI

      DOI 10.1007/s00299-016-2011-1

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Comparison of the complete genome sequences of four gamma-hexachlorocyclohexane-degrading bacterial strains: insights into the evolution of bacteria able to degrade a recalcitrant man-made pesticide2016

    • Author(s)
      Tabata M, Ohhata S, Nikawadori Y, Kishida K, Sato T, Kawasumi T, Kato H, Ohtsubo Y, Tsuda M, Nagata Y
    • Journal Title

      DNA Research

      Volume: 23 Pages: 581-599

    • DOI

      doi: 10.1093/dnares/dsw041

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] マウス白血病ウィルス由来逆転写酵素のN-tailing活性と解析ツールTraceViewer2017

    • Author(s)
      大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市京都女子大学
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] IncP-9群プラスミドの接合伝達に関わる全遺伝子の同定2017

    • Author(s)
      岸田 康平、ルーカス ティム、大坪嘉行、永田裕二、津田雅孝
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] 細菌由来のデアミナーゼ―デハロゲナーゼ融合タンパク質の機能解析2017

    • Author(s)
      佐藤 あや華、加藤 広海、大坪 嘉行、津田 雅孝、永田 裕二
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市京都女子大学
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] 環境常在細菌に見出された新規低栄養環境適応機構に関する研究2017

    • Author(s)
      稲葉 慎之介、加藤 広海、大坪 嘉行、津田 雅孝、永田 裕二
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] 土壌細菌Burkholderia multivoransにおける鉄硫黄クラスター生合成系の転写制御機構の解析2017

    • Author(s)
      野々山 翔太、佐藤 拓哉、岸田 康平、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市京都女子大学
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] 土壌細菌Burkholderia multivoransの土壌における適応機構の解明2017

    • Author(s)
      田上諒、西山 依里、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市京都女子大学
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] フェナントレン分解細菌の生育阻害の緩和に対する非分解細菌の生細胞の重要性2017

    • Author(s)
      小川 なつみ、加藤 広海、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] 難分解性有機塩素系殺虫剤の分解細菌コミュニティにおける非分解菌の役割2017

    • Author(s)
      加藤 広海、大坪 嘉行、津田 雅孝、永田 裕二
    • Organizer
      日本農芸化学会2017年度大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市京都女子大学
    • Year and Date
      2017-03-17 – 2017-03-20
  • [Presentation] 有機塩素系殺虫剤γ-hexachlorocyclohexane分解コミュニティのメタゲノム解析2017

    • Author(s)
      加藤広海、大坪嘉行、津田雅孝、永田裕二
    • Organizer
      第11回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      神奈川県藤沢市慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス
    • Year and Date
      2017-03-02 – 2017-03-04
  • [Presentation] 逆転写酵素の強いtailing活性と解析ソフトTraceViewer2017

    • Author(s)
      大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      第11回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      神奈川県藤沢市慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス
    • Year and Date
      2017-03-02 – 2017-03-04
  • [Presentation] Burkholderia multivoransの鉄硫黄クラスター生合成遺伝子群に対する転写因子Fur及びIscRの作用機序2017

    • Author(s)
      野々山 翔太、佐藤 拓哉、岸田 康平、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      第11回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      神奈川県藤沢市慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス
    • Year and Date
      2017-03-02 – 2017-03-04
  • [Presentation] フェナントレン分解細菌Mycobacterium sp. EPa45株のフェナントレンに対する転写応答2017

    • Author(s)
      小川 なつみ、石毛 太一郎、加藤 広海、大坪 嘉行、永田 裕二、吉川 博文、津田 雅孝
    • Organizer
      第11回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      神奈川県藤沢市慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス
    • Year and Date
      2017-03-02 – 2017-03-04
  • [Presentation] フェナントレン分解細菌の基質耐性突然変異株の取得と解析2017

    • Author(s)
      池内 倫子、小川 なつみ、加藤 広海、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      第11回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      神奈川県藤沢市慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス
    • Year and Date
      2017-03-02 – 2017-03-04
  • [Presentation] 金属イオンコファクターの違いによる接合伝達の鍵酵素relaxaseのnick導入塩基配列特異性の変化2017

    • Author(s)
      岸田 康平、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      第11回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      神奈川県藤沢市慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス
    • Year and Date
      2017-03-02 – 2017-03-04
  • [Presentation] 再構築された土壌微生物群集の超長期培養2016

    • Author(s)
      加藤広海、渡来直生、森宙史、大坪嘉行、永田裕二、黒川顕、津田雅孝
    • Organizer
      日本微生物生態学会第31回大会
    • Place of Presentation
      神奈川県横須賀市横須賀市文化会館
    • Year and Date
      2016-10-22 – 2016-10-25
    • Invited
  • [Presentation] 土壌環境におけるBurkholderia属細菌の生育段階と土壌高発現遺伝子の転写変動パターンの関係性2016

    • Author(s)
      田上 諒、西山 依里、大坪 嘉行、永田 裕二、津田 雅孝
    • Organizer
      日本微生物生態学会第31回大会
    • Place of Presentation
      神奈川県横須賀市横須賀市文化会館
    • Year and Date
      2016-10-22 – 2016-10-25
  • [Presentation] リボソームRNAオペロンが染色体に存在しない細菌の発見2016

    • Author(s)
      按田瑞恵、大坪嘉行、大久保卓、菅原雅之、永田裕二、津田雅孝、南澤究、三井久幸
    • Organizer
      日本RNA学会-第4回 RIBOSOME MEETING
    • Place of Presentation
      大阪府高槻市大阪医科大学
    • Year and Date
      2016-09-17 – 2016-09-18
  • [Presentation] Plant-associated Aureimonas with the sole rRNA operon on a tiny plasmid2016

    • Author(s)
      M Anda, Y Ohtsubo, Ti Okubo, M Sugawara, Y Nagata, M Tsuda,S Ikeda, S Eda, H Mitsui, K Minamisawa
    • Organizer
      16th International Symposium on Microbial Ecology
    • Place of Presentation
      Palais des Congres de Montreal, Montreal, Canada
    • Year and Date
      2016-08-21 – 2016-08-26
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Construction of in vivo evolution system for haloalkane dehalgenases2016

    • Author(s)
      Y. Nagata, R. Moriuchi, A. Koyama, Y. Ohtsubo, L. Chrast, J. Damborsky, and M. Tsuda
    • Organizer
      2nd ASM Conference on Experimental Microbial Evolution
    • Place of Presentation
      The Mayflower Hotel, Washington DC, USA
    • Year and Date
      2016-08-04 – 2016-08-07
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 環境常在細菌に見出された新規低栄養環境適応機構2016

    • Author(s)
      稲葉慎之介、大坪嘉行、永田裕二、津田雅孝
    • Organizer
      環境バイオテクノロジー学会2016年度大会
    • Place of Presentation
      広島県広島市広島県民文化センター
    • Year and Date
      2016-06-13 – 2016-06-14
  • [Presentation] ナフタレン分解プラスミドNAH7の接合伝達関連遺伝子の解析2016

    • Author(s)
      岸田康平、大坪嘉行、永田裕二、津田雅孝
    • Organizer
      環境バイオテクノロジー学会2016年度大会
    • Place of Presentation
      広島県広島市広島県民文化センター
    • Year and Date
      2016-06-13 – 2016-06-14
  • [Presentation] 土壌における細菌叢の形成・定着過程の長期モニタリング2016

    • Author(s)
      加藤広海、渡来直生、森宙史、永田裕二、黒川顕、津田雅孝
    • Organizer
      環境バイオテクノロジー学会2016年度大会
    • Place of Presentation
      広島県広島市広島県民文化センター
    • Year and Date
      2016-06-13 – 2016-06-14
  • [Book] Manual of Environmental Microbiology, 4th Edition2016

    • Author(s)
      Nagata Y, Tabata M, Ohtsubo, Y, Tsuda M
    • Total Pages
      電子媒体
    • Publisher
      ASM Press, Washington, DC

URL: 

Published: 2018-01-16  

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