2018 Fiscal Year Annual Research Report
Challenge to novel antiviral strategy by suppressing signal transduction pathway
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16K15258
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
松川 昭博 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (90264283)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | MAPKシグナル伝達 / シグナル伝達抑制 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1) Cell-penetrating peptide (CPP)-Spred2の作成と効果検証：CPPとして、HIV-1のTatタンパク質由来の塩基性ペプチド（TAT：GRKKRRQRRRPPQ)をRaf結合部位（Spred2はRafに結合して、Raf-Ras-ERK-MAPKを抑制する）が近いC末端側に組込んだ遺伝子組換体（pET21a h-spred2-TAT）を作製し、大腸菌で大量発現させた。通常の可溶性タンパクとして抽出が困難であったため、封入体可溶化し、His-tag精製を行い、dropping法でリフォールディングして濃縮してTAT-spres2タンパクを得た。得られたTAT-Spred2をH1993細胞およびHepG2細胞に添加したところ、いずれでもSpred2タンパクの強発現を確認できた。しかし、ERK活性化は抑制できず、また、Ras-Raf-ERK活性阻害で起こるべき細胞増殖抑制も確認できなかった。FGF刺激により、Raf-Ras-ERK-MAPK活性化を誘導した状況でも、同様の結果であった。以上より、作製したTAT-Spred2タンパクは細胞内には導入されるものの、その機能を発揮しないと判断した。
２）Spred-2過剰発現によるインフルエンザ感染抑制 ：Spred-2過剰発現マウスにH1N1/PR8の感染実験を行ったが、現時点で感染肺の重症度に大きな違いを見ていない。
３）ヒト肺線維症肺を用いての検討：ブレオマイシン（Bleomycin）誘導肺線維症はSpred2欠損マウスで軽減する。そこで、肺線維症患者の摘出肺でのSpred2発現量を、非線維症肺を対照として比較検討したところ、肺線維症肺では、Spred2発現量は有意に高値を示した。内因性Spred2は線維化に対して対症的に発現上昇し、線維化抑制に働くものの、発現量が不十分である可能性がある。
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Research Products
(20 results)
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[Journal Article] A Novel Combination Cancer Therapy with Iron Chelator Targeting Cancer Stem Cells via Suppressing Stemness2019
Author(s)
Katsura Y, Ohara T, Noma K, Ninomiya T, Kashima H, Kato T, Sato H, Komoto S, Narusaka T, Tomono Y, Xing B, Chen Y, Tazawa H, Kagawa S, Shirakawa Y, Kasai T, Seno M, Matsukawa A, Fujiwara T
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Journal Title
Cancers (Basel)
Volume: 11(2)
Pages: 177
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] The relationship between the PD-L1 expression of surgically resected and fine-needle aspiration specimens for patients with pancreatic cancer.2019
Author(s)
Matsumoto K, Ohara T, Fujisawa M, Takaki A, Takahara M, Tanaka N, Kato H, Horiguchi S, Yoshida R, Umeda Y, Fushimi S, Yagi T, Matsukawa A, Okada H
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Journal Title
J Gastroenterol.
Volume: Apr 29
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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