2016 Fiscal Year Research-status Report
がん微小環境におけるエクソソーム由来分泌型非コードＲＮＡの機能とその臨床応用
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16K15496
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| Research Institution | Saitama Medical University |
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Principal Investigator |
堀江 公仁子 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (90261982)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高山 賢一 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究員 (50508075)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | がん微小環境 / エクソソーム / 非コードRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
２８年度は乳がん・前立腺がんにおいて、ホルモン治療抵抗性モデルがん細胞とホルモン感受性がん細胞との比較から、がん病態進展にかかわる非コードＲＮＡのうち、特にホルモン受容体のゲノム結合領域近傍に位置するアンチセンスＲＮＡに着目し、がん細胞のＲＮＡシーケンスデータからホルモン応答性に発現上昇する長鎖非コードＲＮＡ候補を複数同定した。また、乳がん・前立腺がんの臨床検体におけるＲＮＡシーケンスデータから、それらの非コードＲＮＡが発現が亢進している症例が多く存在することを見出し、がん診断バイオマーカーとしての可能性を示すことができた。注目される非コードＲＮＡに対して、特異的なsiRNAの作製を行い、ＲＮＡレベルでの発現抑制が得られることを確認し、がん細胞の増殖性や移動性、細胞周期に対する作用を検討した。いくつかのsiRNAについては、ホルモン受容体のプロモーター活性解析やクロマチン免疫沈降アッセイから、エピゲノム作用に直接作用する可能性が示された。
がん細胞からのエクソソーム分離については、超遠心を用いて濃縮したエクソソーム試料において、マーカー蛋白質やがん細胞で過剰発現する蛋白質の発現を、ウエスタン法を用いて確認することに成功した。さらに、がん由来のエクソソームを腫瘍免疫にかかわるＴ細胞系細胞に取り込ませ、元となるがん細胞の性質により、Ｔ細胞系の細胞傷害性にかかわる遺伝子の発現が調節されることを見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
がん細胞から超遠心法を用いてエクソソームを抽出し、エクソソームマーカー蛋白質の発現を指標に、エクソソームを濃縮できる手法が確立し、さらにがん由来のエクソソームをがん微小環境にかかわる免疫系細胞等へ作用させる実験が可能となった。
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| Strategy for Future Research Activity |
各種病態のがん細胞からのエクソソーム抽出を行い、そこに内包される非コードRNAの同定と機能解析を行って、がん病態におけるエクソソーム由来の非コードRNAの作用を明らかにする。研究代表者と研究分担者が注目している乳がんと前立腺がんの非コードRNAについても、がん細胞での過剰発現および発現抑制を行った場合に、そこから分離されるエクソソームによってがん微小環境の細胞がどのように影響を受けるかについても解析を行う。
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| Causes of Carryover |
次年度の効率的な研究推進のため、試薬・消耗品等の物品費、旅費と学会参加費、人件費に支出するための必要が出てきたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
試薬・消耗品等の物品費を主体に、旅費とその他としての学会参加費、人件費に使用予定である。
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[Journal Article] Abhydrolase domain containing 2, an androgen target gene, promotes prostate cancer cell proliferation and migration.2016
Author(s)
Obinata D, Takada S, Takayama K, Urano T, Ito A, Ashikari D, Fujiwara K, Yamada Y, Murata T, Kumagai J, Fujimura T, Ikeda K, Horie-Inoue K, Homma Y, Takahashi S, Inoue S.
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Journal Title
Eur J Cancer
Volume: 57
Pages: 39-49
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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