2017 Fiscal Year Annual Research Report
Development of innovative combination therapy of tumor antigen virus and TCR gene-modified T cells
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16K15611
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
粕谷 英樹 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (00402636)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
駱 晨虹 名古屋大学, 医学系研究科, 招へい教員 (40759627)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | HF10 / 癌 / 免疫細胞療法 / TCR遺伝子改変T細胞 / 癌抗原 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、ウイルスゲノム中に癌特異的抗原を発現するように遺伝子改変した腫瘍溶解性ウイルスHF10とウイルスが産生する癌抗原を認識するようにTCR遺伝子改変したT細胞の組み合わせによる新規治療法の開発を目的としている。
HF10ゲノムのUL43遺伝子はフレームシフト変異のため機能していないことから、この遺伝子座に癌抗原遺伝子を導入することを計画した。CMVプロモーターにより癌抗原遺伝子発現を制御し、IRESを介してZsGreen1も発現するようにした外来遺伝子カセットの両端にUL43遺伝子と同じ塩基配列を配したプラスミドを構築した。このプラスミドをHF10ゲノムと共にVero細胞にトランスフェクションし、相同組換えにより外来遺伝子をUL43遺伝子座に組み込む方法を用いた。これによりZsGreen1のみを発現するHF10の構築を試みたが、相同組み換えの効率の低さが問題となった。そこで、相同組み換え効率の向上のためにCRISPR/Cas9ゲノム編集技術の有用性を検討した。ガイドRNAとCas9タンパク質のリボ核タンパク質複合体（RNP complex）を用いてIn vitroでHF10ゲノムの切断を行い、PCRによりUL43遺伝子を検出したところ、UL43遺伝子を確かに切断する事が確認された。また、RNP complexを作用させたHF10ゲノムをVero細胞にトランスフェクションしてもウイルスの産生が見られない事を確認した。このことから、CRISPR/Cas9ゲノム編集が相同組み換えの向上と遺伝子改変ウイルスの純化に非常に適した技術であることが分かった。今後は、この技術を用いて癌抗原遺伝子導入HF10の開発を進める。さらに、癌抗原特異的なTCR遺伝子改変T細胞を作製し、癌抗原遺伝子導入HF10の抗腫瘍効果の検討、さらに抗原特異的TCR遺伝子改変T細胞との併用効果を検討する。
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Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Genomic Signature of the Natural Oncolytic Herpes Simplex Virus HF10 and Its Therapeutic Role in Preclinical and Clinical Trials.2017
Author(s)
Ibrahim Ragab Eissa, Yoshinori Naoe, Itzel Bustos-Villalobos, Toru Ichinose, Maki Tanaka, Wu Zhiwen, Nobuaki Mukoyama, Taishi Morimoto, Noriyuki Miyajima, Hasegawa Hitoki, Seiji Sumigama, Branko Aleksic, Yasuhiro Kodera and Hideki Kasuya.
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Journal Title
Front. Oncol.
Volume: 7
Pages: 149
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] 膵空腸吻合におけるBlumgart 変法縫合（Nagoya method）の短期および長期成績2017
Author(s)
藤井 努, 山田 豪, 杉本 博行, 高見 秀樹, 林 真路, 神田 光郎, 二宮 豪, 高野 奈緒, 森本 大士, 多代 充, 田中 伸孟, 岩田 直樹, 丹羽 由紀子, 小林 大介, 田中 千恵, 中山 吾郎, 粕谷 英樹, 小池 聖彦, 藤原 道隆, 小寺 泰弘
Organizer
第117 回日本外科学会定期学術集会
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[Presentation] ヒト膵癌異種移植モデルにおけるnab-Paclitaxel（nab-PTX）と腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルスHF10 との併用療法2017
Author(s)
森本 大士, 直江 吉則, 一ノ瀬 亨, Bustos Itzel, 神田 光郎, 丹羽 由紀子, 岩田 直樹, 林 真路, 小林 大介, 田中 千恵, 山田 豪, 中山 吾郎, 杉本 博行, 小池 聖彦, 藤原 道隆, 藤井 努, 田中 舞紀, 粕谷 英樹, 小寺 泰弘
Organizer
第117 回日本外科学会定期学術集会
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[Presentation] ヒト大腸がんモデルにおけるセツキシマブとの併用による腫瘍溶解性ウイルスHF10 の抗腫瘍効果2017
Author(s)
呉 智聞, 一ノ瀬 亨, 駱 晨虹, 直江 吉則, イッツェル・ブストス・ビジャロボス, 山田 豪, 藤井 努, 杉本 博行, 森本 大士, 向山 宣昭, 小寺 泰弘, 田中 舞紀, 粕谷 英樹
Organizer
第117 回日本外科学会定期学術集会
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[Presentation] Combination therapy of PD-L1 immune checkpoint inhibitor and oncolytic herpes simplex virus HF102017
Author(s)
Mukoyama N, Naoe Y, Ichinose T, Nassr E. I. R, Luo C, Villalobos I. B, Zhiwen W, Miyajima N, Morimoto D, Tanaka M, Fujimoto Y, Sone M, Kodera Y, Kasuya H.
Organizer
第23回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
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[Presentation] Combination therapy against human pancreatic cancer with oncolytic herpes virus HF10 and abraxane2017
Author(s)
Wu Z, Ichinose T, Luo C, Naoe Y, Villalobos I. B, Yamada S, Fujii T, Sugimoto H, Miyajima N, Morimoto D, Mukoyama N, Nishikawa Y, Koide U, Kuwahara T, Kodera Y, Tanaka M, Kasuya H.
Organizer
第23回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
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[Presentation] Systemic therapeutic potential of oncolytic herpes simplex virus HF10 adsorbed on antigen-specific lymphocytes2017
Author(s)
Ichinose T, Naoe Y, Nassr E. I. R, Luo C, Villalobos I. B, Zhiwen W, Mukoyama N, Miyajima N, Morimoto D, Yamada S, Fujii T, Sugimoto H, Tanaka M, Kodera Y, Kasuya H.,
Organizer
第23回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
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[Presentation] Clinical trial data using HF10, oncolytic herpes simplex virus2017
Author(s)
Kasuya H, Ichinose T, Naoe Y, Villalobos I. B, Nassr E. I. R, Luo C, Zhiwen W, Mukoyama N, Miyajima N, Morimoto D, Hirooka Y, Goto H, Tanaka M.
Organizer
第23回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
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[Presentation] COMBINATION THERAPY AGAINST HUMAN COLORECTAL CANCER WITH THE EPIDERMAL GROWTH FACTOR RECEPTOR INHIBITOR CETUXIMAB AND ONCOLYTIC HERPES SIMPLEX VIRUS HF102017
Author(s)
呉 智聞, 一ノ瀬 亨, 駱 晨虹, 直江 吉則, ヴィラロボス イッツェル・バストス, 山田 豪, 杉本 博行, 宮嶋 則行, 森本 大士, 向山 宣昭, 西川 洋子, 小出 悠介, 小寺 泰弘, 田中 舞紀, 粕谷 英樹
Organizer
第55回日本癌治療学会学術集会
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[Presentation] Combination therapy of PD-L1 immune checkpoint inhibitor and oncolytic herpes simplex virus HF102017
Author(s)
森本 大士, 直江 吉則, 向山 宜明, 一ノ瀬 亨, Itzel Bustos Villalobos, 神田 光郎, 丹羽 由紀子, 岩田 直樹, 林 真路, 小林 大介, 田中 千恵, 中山 吾郎, 山田 豪, 杉本 博行, 小池 聖彦, 藤原 道隆, 田中 舞紀, 藤本 保志, 粕谷 英樹, 小寺 泰
Organizer
第28回日本消化器癌発生学会総会
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[Presentation] 腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルスHF10と免疫チェックポイント阻害剤の併用2017
Author(s)
森本 大士, 直江 吉則, 向山 宜明, 宮嶋 則行, Ibrahim Ragab Eissa, 一ノ瀬 亨, Itzel Bustos-Villalobos, 山田 豪, 田中 舞紀, 藤本 保志, 小寺 泰弘, 粕谷 英樹
Organizer
第51回制癌剤適応研究会
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