2016 Fiscal Year Research-status Report
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16K15639
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
麓 敏雄 弘前大学, 医学研究科, 助教 (80463206)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 発現ベクター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
SDラットのThymusおよびSpleenよりmRNAを抽出し、RT-PCRによりThromboxane A2 receptorおよびProstaglandin I2 receptor cDNAを増幅し、pcDNA3ベクターにクローニングした。
Thromboxane A2 receptorのC末端にPCRによって増幅したEYFP遺伝子をつなぎ、さらに細胞内ループ領域1にRluc遺伝子を挿入したプラスミドを作成した。同様に、C末端にEYFP、細胞内ループ領域2にRlucを挿入したプラスミドを作成した。さらに、C末端にEYFP、細胞内ループ領域3の異なる位置にRlucを挿入した2種類のプラスミドを作成した。
また、Prostaglandin I2 receptorのC末端にEYFP遺伝子をつなげたプラスミド、C末端細胞内領域にEYFP遺伝子を挿入したプラスミドを作成した。この2種のプラスミドの細胞内ループ領域1にRluc遺伝子を挿入した。同様に、C末端またはC末端細胞内領域にEYFP、細胞内ループ領域2にRlucを挿入したプラスミドを作成した。さらに、C末端またはC末端細胞内領域にEYFP、細胞内ループ領域3の異なる位置にRlucを挿入した合計4種類のプラスミドを作成した。
さらに、Thromboxane A2 receptorのC末端にRluc遺伝子をつなぎ、さらに細胞内ループ領域3にEYFP遺伝子を挿入したプラスミドを作成した。また、Prostaglandin I2 receptorのC末端にRluc遺伝子をつなげたプラスミド、C末端細胞内領域にRluc遺伝子を挿入したプラスミドを作成し、この2種のプラスミドの細胞内ループ領域3にEYFP遺伝子を挿入した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
平成28年度は、その他の業務の実施に必要となる時間の変更に伴い、研究のための時間を当初予定よりとることができなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初、平成29年度前半終了をめどにagonistおよびantagonistに応答するThromboxane A2 receptor、Prostaglandin I2 receptor由来のバイオセンサーを完成する計画であったが、予定より少し遅れているので、4種類のバイオセンサーのうち完成したものから、逐次それらを用いた解析を進めていく。
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| Causes of Carryover |
当初予定通りの研究時間を割けず研究の進捗が遅れているため、物品費等の支出が少なかった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
研究の遂行をより効率的に行って平成29年度には平成28度の遅れを取り戻す予定なので、平成28年度未使用分は平成29年度中に使用する予定である。
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