2017 Fiscal Year Research-status Report
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16K15639
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
麓 敏雄 弘前大学, 医学研究科, 助教 (80463206)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 発現ベクター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ラットThromboxane A2 receptorのC末端にEYFP遺伝子を、細胞内ループ領域1、２にRluc遺伝子を挿入したプラスミドを各１種、細胞内ループ領域3の異なる位置にRlucを挿入した2種類のプラスミドを作成した。 同様に、Prostaglandin I2 receptorについても、EYFP、Rlucを挿入した合計4種類のプラスミドを作成した。
これらの発現ベクターをリポフェクションによって293T細胞に導入し、Thromboxane A2 receptor についてはBRET assayによって、１種類のantagonistに対する応答性を検討した。その結果、細胞内ループ領域3にRlucを挿入したプラスミドの一つに良好な反応性が見られた。そこで、このプラスミドを元に、Rlucの位置をさらに１アミノ酸ずつ前後にずらしたプラスミド４種類を作成し、antagonistに対する応答性をさらに検討した。
Prostaglandin I2 receptorについては、同様に１種類のagonistに対する応答性を検討したが、4種類すべてで、良好な結果が得られなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
当初想定していた結果が得られなかった場面が多く、その原因究明のために、多くの時間を要した。
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| Strategy for Future Research Activity |
進んでいるThromboxane A2 receptorを優先して、研究を進める。
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| Causes of Carryover |
理由：研究の進捗が遅れているため、物品費等の支出が少なかった。
使用計画：前年度までの遅れを取り戻すために、未使用分は平成30年度中に使用する予定である。
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