2017 Fiscal Year Annual Research Report
In vivo functional genomics screen reveals mechanism of peritoneal dissemination in ovarian cancer
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16K15706
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
小西 郁生 京都大学, 医学研究科, 名誉教授 (90192062)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松村 謙臣 近畿大学, 医学部, 教授 (20452336)
安彦 郁 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20508246)
濱西 潤三 京都大学, 医学研究科, 講師 (80378736)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 癌幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
レンチウイルスベクターに組み込まれたshRNAライブラリーをマウス卵巣癌細胞株であるHM-1およびID8に添加したところ、安定したマーカー発現を得た。こうして得たshRNAライブラリー導入マウス卵巣癌細胞株をそれぞれ同系の免疫正常マウスに腹腔内接種して腫瘍形成を観察した。HM-1では腫瘍が回収できたものの、回収した腫瘍内のHM-1細胞にshRNA配列が入っていなかった。ID8では腹膜播種腫瘍が形成されず、腫瘍の回収ができなかった。遺伝子導入したマウス卵巣癌細胞株は何らかの理由（免疫により排除されるなど）で、腫瘍形成できなかったと考えられる。そこで、次に、同様の手法で、レンチウイルスベクターに組み込まれたヒト遺伝子を標的としたshRNAライブラリーをヒト卵巣癌細胞株に安定導入した。すると、発現抑制によりHoechst 33342の高い排出能をもつSide Population細胞が増加する 6つの遺伝子を同定した。Side Population細胞は癌幹細胞の形質の一つと考えられている。これらの遺伝子について、それぞれshRNA により発現抑制株を作成し、コントロール株と比較して幹細胞形質を獲得しているかどうか、機能実験を行ったところ、スフィア形成能や、単細胞クローン形成能、マウスにおける腫瘍形成能、抗がん剤耐性といった悪性形質がいずれも上昇していることを見出した。さらに、これらの悪性形質獲得は、Hedgehog経路の活性化を通じてもたらされることを示した。
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Research Products
(1 results)
