2016 Fiscal Year Research-status Report

シングルセル解析による次世代頭頸部癌個別化治療法の開発

Research Project

Project/Area Number	16K15718
Research Institution	Kanazawa University
Principal Investigator	近藤悟金沢大学, 附属病院, 講師 (70436822)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	吉崎智一金沢大学, 医学系, 教授 (70262582)
Project Period (FY)	2016-04-01 – 2018-03-31
Keywords	シングルセル / 血中循環腫瘍細胞 / EpCAM
Outline of Annual Research Achievements	癌組織は非常に不均一な癌細胞集合体で、癌のいわゆる悪性度を規定する細胞はその一部である。しかしPET／miRNA／マイクロアレイなどに評価は癌組織全体を対象とするため、悪性度を反映する集団の生物学的特性はマスクされてしまう。正確な悪性度評価には癌組織全体でなく悪性度の高い細胞を選別して解析する必要がある。末梢循環癌細胞（Circulating Tumor cell; CTC）は原発巣癌細胞集団の中でも浸潤や転移能力が高く、癌の悪性度・生物学的特性を最も反映する集団と考えられる。本研究では、頭頸部癌のCTCに焦点を当て研究を行った。本年度は患者血中よりCTCを検出するシステムを構築を目指した。当初予定していたテロメスキャンでは安定してCTCを検出できなかったため、EpCAM抗体をマイクロチップに抗体を固定してCTCを検出する方法を用いて検出を行った。がん細胞株の検出は問題なく行うことができたが実際のがん患者の血液から安定してCTCを検出することは難しかった。血液を流すのに長時間かける必要性があり血液を濃縮することが問題となった。特にがん細胞株は検出抗体に使用したEpCAMの発現が高いのに比して、実際のがん細胞は細胞株ほどEpCAMの発現が高くないことが予備実験によって判明した。したがって、抗EpCAM抗体単独でのCTC検出は限界があり、他の方法を検討する必要性があると考えられ現在検討中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 当初考えていたテロメスキャンならびにEpCAM抗体を固定したマイクロチップではCTCの検出が不完全であり、他の方法の併用があると考えられたため、血中CTCの検出法にもう少し検討が必要であるため。
Strategy for Future Research Activity	物理学的フィルターを用いたCTC検出法を検討する予定である。これを併用することでチップに流す血液の体積を減少させることが可能である。
Causes of Carryover	今年度の研究費としては若干当初の使用金額に達しなかった。当初予定していた物品費が安価に進んだため、予定使用額に達しなかった。
Expenditure Plan for Carryover Budget	体積を減らしたサンプルを測定することになったため、２年目は想定より物品費が必要であると考えられる。体積を減らしたサンプルの測定を継続する。