2018 Fiscal Year Research-status Report
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16K15724
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
稲垣 彰 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (70405166)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
蒲谷 嘉代子 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (50569259)
村上 信五 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (80157750)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 内耳 / カルシウムチャネル / 薬理学的制御 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
カルシウムチャネルをターゲットとして内耳におけるカルシウムシグナリングに関連する分子の網羅的解析を行ったところ、他臓器では重要な役割を果たす分子であるが、内耳における発現は過去に報告のないカルシウム検知受容体の発現をらせん靭帯や蝸牛軸線維芽細胞を中心とした領域に同定した。前年度までに行った形態学的検討に加え、外科的手術法を用いた内耳外リンパに対する拮抗薬投与における機能解析を行った。その結果、30ｄB程度の難聴が生じることが明らかとなり、同因子の内耳における重要な機能が明らかとなった。さらに、同部での機能発現を明らかにするために、カルシウムイメージング法を用いた確認実験を行い、細胞内カルシウムの動態を検討し、その機能的な発現を確認した。同部におけるカルシウムシグナリングの確認法として、カルシウムイメージングを用いた報告は過去になく、方法論の開発としても意義があるものと考えている。これらの反応は拮抗薬で消失することから、正常細胞におけるカルシウム動態の変化は本因子の機能を反映していると考えている。本成果は現在海外分子生物学雑誌に投稿、査読中である。
同時に、本因子が欠損した遺伝子改変マウスの作成をcrispr技術を用いて行っている。技術的な問題で、同時に2因子のノックアウトが必要となることから、技術的な難度が高い実験であるが、難航している。引き続き、遺伝子欠損マウスの作製を継続して行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
遺伝子改変マウスの作製に、crisper技術を用いたダブルノックアウトが必要なことから技術的な難度が高く、難航している。
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| Strategy for Future Research Activity |
応じて、今後の実験に必要な助力を依頼する予定である。現在も、本学、動物実験研究教育センターとの共同研究にてCrispr技術による遺伝子改変動物の作成を、また、本学薬学研究科との共同研究によりカルシウムイメージングによる検討を行っている。今後も共同研究施設との共同研究により、研究を推進する予定である。
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| Causes of Carryover |
Crisper技術を用いたダブルノックアウトの作成を行っているが、難航しているため。
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