2017 Fiscal Year Annual Research Report
Design of a novel affinity labeling probe exhibiting fluorescence and luminescence
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16K17930
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
山口 卓男 大阪大学, 薬学研究科, 講師 (80596601)
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2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | アフィニティーラベル化 / 生物活性化合物 / 標的タンパク質 / 標的同定 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では、生物活性化合物の標的タンパク質を高選択的にラベル化する技術の開発に取り組んできた。また、標的タンパク質の高感度検出を視野に入れ、２段階発光機能（蛍光能と化学発光能）を搭載したプローブ分子を設計し、合成と評価に取り組んできた。昨年度までの研究成果から、モデルの生物活性化合物と標的タンパク質を用いた系において、設計していたプローブ分子が期待通り機能し、標的タンパク質を高選択的に蛍光ラベル化できることを見出した。今年度は、標的タンパク質への選択性をさらに詳細に検証し、また、化学発光検出に向けた基礎的な研究も実施した。その結果、以下のような成果を得た。
［研究成果１］複数のモデルに対し、設計したプローブ分子の機能を評価した結果、期待通り標的タンパク質が高選択的に蛍光ラベル化されることが明らかになった。
［研究成果２］標的タンパク質のラベル化について、その効率を質量分析により評価した結果、高い効率（約３０％）で標的タンパク質のラベル化が進行することが明らかになった。
［研究成果３］ラベル化部位に関して、質量分析により解析した結果、リガンド結合サイト近傍でラベル化が進行したことが明らかとなった。よって、今回創出した手法は「標的タンパク質同定法」としてだけでなく、「リガンド結合サイト同定法」としても有用であることが明らかになった。
［研究成果４］当初設計の通り、今回設計したプローブ分子は適度な反応性を有し、標的タンパク質の蛍光ラベル化後、化学発光にて検出するのに適した骨格であることが試験管内反応により明らかになった。
以上の研究成果について、学術論文や学会にて発表を行った。
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| Remarks |
大阪大学大学院薬学研究科生物有機化学分野：http://www.phs.osaka-u.ac.jp/homepage/b007/
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Research Products
(9 results)
