ビタミンC、Eの同時不足がエストロゲン欠乏マウスの皮膚に及ぼす影響

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K18705
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Geriatric Hospital and Institute of Gerontology
• Principal Investigator: 近藤 嘉高 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究員 (20507397)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: ビタミンC

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、申請者らが独自に開発したビタミンC（VC）を体内で合成できないSMP30ノックアウト（KO）マウスと、エストロゲンを合成できないAromatase（Ar）-KOマウス、ヘアレスマウスを掛け合わせたSMP30/Arダブルノックアウト（DKO）ヘアレスマウスを用いて、青壮年期の女性（エストロゲン充分）や更年期以降の女性（エストロゲン欠乏）の皮膚におけるVC不足, VE不足, ２重（同時）不足が皮膚に及ぼす影響、特に紫外線による皮膚の黒化やシワの形成（光老化）に及ぼす影響を明らかにする。本研究により、閉経前と閉経後の女性におけるVC, VE, その相互作用の光老化抑制効果を明らかにできる。
本年度までに、VC, VE, エストロゲンを合成できないSMP30/Ar-DKOヘアレスマウスを作出した。SMP30/Ar-DKOヘアレスマウスの作出は、自然交配では長期間を要する上、Ar-KOマウスは不妊のため、作出効率が著しく低い。そこで、各マウスから卵子と精子を採取して体外受精・胚移植することにより、不妊マウスの仔も得られ、短期間で交配を進めることを目指した。初めに、体内でVCを合成できないSMP30-KOマウスとHos:HR-1ヘアレスマウス（アルビノ、無毛のため皮膚の解析が容易）と交配し、SMP30-KOヘアレスマウス [無毛で黒色（メラニン合成可）、VC, VEを合成できないが、エストロゲンは合成できる]を得た。次に、エストロゲンを合成できないAr-KOマウスと交配し、SMP30/Ar-DKOヘアレスマウス [無毛で黒色（メラニン合成可）、VC, VE, エストロゲンを合成できない）を作出した。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

本年度までに、VC, VE, エストロゲンを合成できないSMP30/Ar-DKOヘアレスマウスの作出に成功した。即ち、初めに、体内でVCを合成できないSMP30-KOマウスとHos:HR-1ヘアレスマウス（アルビノ、無毛のため皮膚の解析が容易）と交配し、SMP30-KOヘアレスマウス [無毛で黒色（メラニン合成可）、VC, VEを合成できないが、エストロゲンは合成できる]を得た。次に、エストロゲンを合成できないAr-KOマウスと交配し、SMP30/Ar-DKOヘアレスマウス [無毛で黒色（メラニン合成可）、VC, VE, エストロゲンを合成できない）を作出した。しかし、実験群のマウスを作出するために必要なメスのSMP30/Ar-DKOヘアレスマウスは、体外受精・胚移植を行うのに十分な匹数が得られなかった。そこで、雌雄のSMP30-KO/ArヘテロKOヘアレスマウスを自然交配させて、体外受精・胚移植用のマウスの作出を試みたが、繁殖成績が悪く、体外受精・胚移植に必要な匹数が得られていない。

Strategy for Future Research Activity

実験群に用いるオスのSMP30/Ar-DKOヘアレスマウスを作出するため、本年度から継続して、雌雄のSMP30-KO/ArヘテロKOヘアレスマウスを自然交配させて、体外受精・胚移植用のマウスの作出を目指す。

Causes of Carryover

（理由）
SMP30/Ar-DKOヘアレスマウスの作出について、体外受精・胚移植の費用が抑えられたため。
（使用計画）
翌年度、体外受精・胚移植による実験用マウスの作出に充当する予定である。