2018 Fiscal Year Annual Research Report
Study on the mechanism of intestinal absorption and urinary excretion of pufferfish toxin tetrodotoxin
| Project/Area Number |
16K18750
|
|---|
| Research Institution | Prefectural University of Hiroshima |
|---|
Principal Investigator |
松本 拓也 県立広島大学, 人間文化学部, 准教授 (30533400)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | フグ毒 / テトロドトキシン / 腸管吸収 / 尿中排泄 / トランスポーター / Caco-2 / LLC-PK1 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
研究代表者らは，ブタ腎近位尿細管由来LLC-PK1細胞を用いて，TTXの尿中排泄メカニズムを評価した。その結果，有機カチオントランスポーターの阻害剤であるテトラエチルアンモニウム, L-カルニチンおよびシメチジン添加区のTTXの排泄輸送は，トランスポーター阻害剤を加えない対照区の4割から5割まで有意に低下したことから，有機カチオンを輸送するトランスポーターがTTXを尿中へ排泄していると考えられた。有機カチオンを輸送するトランスポーターであるSLC47に属する薬物排泄トランスポーターMATEsの阻害剤添加区では，TTX輸送量は対照区の9割程度に低下したが，いずれも有意差は認められず，TTXの輸送にはMATEsは関与しないと考えられた。以上の結果から，ヒトにおけるTTXの尿中排泄には，有機カチオンを輸送するトランスポーターであるSLC22に属するOCTsやOCTNsが関与すると考えられた。
また，ヒトの腸管におけるTTXの吸収に関わるトランスポーターの探索については，ヒト腸管上皮由来Caco-2細胞によるTTXの吸収輸送阻害実験を行った結果，有機アニオン輸送ポリペプチドOATPs，薬物排泄トランスポーターMRPsおよび有機カチオントランスポーターOCTsの阻害剤添加区でTTXの吸収輸送に阻害効果が見られた。そこで，これらのトランスポーターを過剰発現させたイヌ腎臓由来MDCK II細胞を構築し，TTXの輸送と細胞内蓄積を評価した。OCT1発現細胞およびOATP2B1発現細胞では，TTXの細胞内蓄積量は，対照区の約1.5倍および約2.2倍に達し，OCT1とOATP2B1はTTXを細胞内に取り込み，TTXの細胞内蓄積を促進していることが示唆された。また，MRP3発現細胞のTTX輸送活性は，対照区と比べて約2倍に達したことから，MRP3はTTXの輸送に関与していることが示唆された。
|
