2017 Fiscal Year Annual Research Report
Reconstitution of a novel recombinant Marek's disease virus as a vector vaccine against poultry red mites
| Project/Area Number |
16K18798
|
|---|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
村田 史郎 北海道大学, 獣医学研究院, 助教 (10579163)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | ワクモ / 組換えワクチン / マレック病 / マレック病ウイルス / 感染性クローン / 組換えウイルス / 弱毒生ワクチン |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
世界中の養鶏場で深刻な問題となっているワクモの新規防除用ワクチンの開発を目指した。本研究では、マレック病弱毒生ワクチンにワクモ抗原遺伝子を組み込み、マレック病の発症予防に加え、ワクモ防除も可能となるワクチン開発を試みた。マレック病ワクチンはほぼ全ての鶏に接種されており、抗ワクモワクチンの実用化を目指すうえで、本研究はワクチン接種にかかる負担軽減に貢献する基礎研究となることが期待される。
ワクモ抗原発現プラスミドを作製し、その発現カセットをマレック病ウイルス（MDV）強毒株であるRB1B株のゲ ノムに挿入した。MDVの病原性に必須であるmeq遺伝子と、目的遺伝子を置換させることで、ワクモ抗原の発現に加え、MDVの病原性を欠失した組換えウイルスの作製を行った。ワクモ抗原遺伝子は、これまでに本研究室で同定したワクチン抗原候補を複数用いた。得られた感染性クローンについて、RFLP、PCR及び塩基配列解析により 、目的領域へのワクモ抗原遺伝子発現カセットの挿入を確認した後、得られた感染性クローンプラスミドをリン酸カルシウム法により培養細胞に導入し、ウイルスの再構成を試みた。しかしウイルスの再構成が認められなかったため、コーディングリージョンのみを挿入した感染性クローン、あるいは抗原タンパク質の機能を損なわせる変異を挿入した感染性クローンを新たに作製した。その結果、コーディングリージョンのみを挿入した感染性クローンプラスミドよりウイルスが再構成された。再構成された組換えウイルスは、親株として用いたRB1B株由来感染性クローンプラスミドより再構成した組換えウイルスと比較しても、in vitroにおける増殖性に差異は認められなかった。また組換えウイルス感染細胞においては、ワクチン抗原タンパク質の発現が確認された。このように、抗ワクモワクチン抗原を発現する弱毒組換えMDVの作製に成功した。
|
-
-
[Journal Article] Prostaglandin E2 induction suppresses the Th1 immune responses in cattle with Johne's disease.2018
Author(s)
Sajiki Y, Konnai S, Okagawa T, Nishimori A, Maekawa N, Goto S, Ikebuchi R, Nagata R, Kawaji S, Kagawa Y, Yamada S, Kato Y, Nakajima C, Suzuki Y, Murata S, Mori Y, Ohashi K.
-
Journal Title
Infect. Immun.
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] In vitro and in vivo antivirus activity of an anti-programmed death-ligand 1 (PD-L1) rat-bovine chimeric antibody against bovine leukemia virus infection.2017
Author(s)
Nishimori, A., Konnai, S., Okagawa, T., Maekawa, N., Ikebuchi, R., Goto, S., Sajiki, Y., Suzuki, Y., Kohara, J., Ogasawara, S., Kato, Y., Murata, S. and Ohashi, K.
-
Journal Title
PLoS One
Volume: 12
Pages: e0174916
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
[Journal Article] Increase of cells expressing PD-1 and PD-L1 and enhancement of IFN-γ production via PD-1/PD-L1 blockade in bovine mycoplasmosis.2017
Author(s)
Goto, S., Konnai, S., Okagawa, T., Nishimori, A., Maekawa, N., Gondaira, S., Higuchi, H., Koiwa, M., Tajima, M., Kohara, J., Ogasawara, S., Kato, Y., Suzuki, Y., Murata, S. and Ohashi, K.
-
Journal Title
Immun. Inflamm. Dis.
Volume: 5
Pages: 355-363
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
[Journal Article] Anti-Bovine Programmed Death-1 Rat-Bovine Chimeric Antibody for Immunotherapy of Bovine Leukemia Virus Infection in Cattle.2017
Author(s)
Okagawa, T., Konnai, S., Nishimori, A., Maekawa, N., Ikebuchi, R., Goto, S., Nakajima, C., Kohara, J., Ogasawara, S., Kato, Y., Suzuki, Y., Murata, S. and Ohashi, K.
-
Journal Title
Front. Immunol.
Volume: 8
Pages: 650
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Identification of an atypical enzootic bovine leukosis in Japan by using a novel classification of bovine leukemia based on immunophenotypic analysis.2017
Author(s)
Nishimori, A., Konnai, S., Okagawa, T., Maekawa, N., Goto, S., Ikebuchi, R., Nakahara, A., Chiba, Y., Ikeda, M., Murata, S. and Ohashi, K.
-
Journal Title
Clin. Vaccine Immunol.
Volume: 5
Pages: e00067-17
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] 牛マイコプラズマ感染症における免疫抑制機序の解明2017
Author(s)
後藤 伸也, 今内 覚, 岡川 朋弘, 西森 朝美, 前川 直也, 樋口 豪紀, 小岩 政照, 田島 誉士, 小原 潤子, 加藤 幸成, 鈴木 定彦, 村田 史郎, 大橋 和彦
Organizer
第160回日本獣医学会学術集会
-
-
-
