細胞内分子薬理に基づく新規尿酸生成抑制薬とプリンアナログの至適併用の確立

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K18935
• Research Institution: University of Fukui
• Principal Investigator: 森田 美穂子 福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 医員 (40623872)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: キサンチンオキシダーゼ阻害薬

Outline of Annual Research Achievements

これまで新規非プリン型XOD阻害薬が6-MPに及ぼす効果増強の分子薬理学的解明を行うために、まず、細胞増殖抑制効果を検討した。培養急性前骨髄球性白血病細胞（HL60）を用いて、XOD阻害薬(フェブキソスタット)存在下、または非存在下に6-MPを一定濃度、一定時間暴露させ、細胞増殖をXTT法により定量し、HL60に対する6-MP単剤の50%増殖阻止濃度（IC50）、フェブキソスタット単剤では細胞増殖抑制効果は認めないことを確認した。今回、従来薬であるアロプリノールでも同様の実験を行った。さらに、ＣＥＭ細胞においてもフェブキソスタットとアロプリノールそれぞれに対して、同様の実験を施行し、異なる細胞でも評価した。
さらに新規XOD阻害薬のトピロキソスタットとの実験結果を照らし合わせ、比較検討を予定している。
さらに、XOD活性の阻害について検討を継続した。新規XOD阻害薬の阻害を検討するための比較検討用の前実験として、6MPとの減量規定が定められているアロプリノールを用いてXOD活性を測定した。アロプリノール存在下/非存在下、フェブキソスタット存在下/非存
在下に、XOD活性を過酸化水素と10-acetyl-3,7-dihydroxyphnoxazineにより生成されるResorufinとして蛍光測定(ex 535/em 590 nm)した。XOD活性の検出できるとされているレベルより低値ではあるが、XOD活性を測定することは確認できた。しかしながら、XOD阻害
薬の有無でのXOD活性の差が小さく、有意な差かどうか判断困難である。さらに測定条件（時間、アロプリノールまたは新規キサンチンオキシダーゼ阻害薬）を変更しつつ、実験を重ねる必要がある。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

平成29年度に再度、妊娠に伴う切迫早産による安静、休業、さらにその後の産休、育休を取得しているため

Strategy for Future Research Activity

今後は、新規XOD阻害薬としてトピロキソスタットも含めて、同様の実験を繰り返し、再現性を確認していく。
必要に応じて、また異なる細胞でも同様の検討を行う。
ＸＯＤ活性測定、フローサイトメトリーによる殺細胞効果の測定も進めていく。
育休復帰後には、実験を再開し、実験助手とともに精力的に実験を行う予定である。

Causes of Carryover

妊娠に伴う休業により実験に遅れが生じているため。
今後も継続して行う、XOD測定、XTTやフローサイトメトリーにかかわる実験の試薬、細胞培養にかかわる経費として使用予定である。