2019 Fiscal Year Annual Research Report
Staphylococcal enterotoxin emetic mechanism revealed by newly primate emetic model, common marmoset
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16K19119
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
小野 久弥 北里大学, 獣医学部, 講師 (80704569)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | コモンマーモセット / 肥満細胞 / ブドウ球菌エンテロトキシン / 嘔吐型食中毒 / 受容体 / 細菌毒素 / 脱顆粒 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までのコモンマーモセット を用いた研究により個体レベルのブドウ球菌エンテロトキシンA（SEA）の嘔吐メカニズムは明らかとなった。
すなわち、（1）経口的に摂取されたSEAは消化管内腔に到達すると、消化管組織内に侵入し短時間で粘膜下組織へと移行する。（2）SEAは粘膜下組織の肥満細胞へと強く結合し、SEAが結合した肥満細胞は脱顆粒を起こす。（3）肥満細胞により放出されたヒスタミンが迷走神経を刺激することで嘔吐中枢へと伝わり、嘔吐反射を惹起する。また、この迷走神経から中枢へと至る伝達にはセロトニンも関与している。このように細胞から個体レベルまでの嘔吐メカニズムを明らかにすることができた。
最終年度は肥満細胞上に存在するSEAと高親和性を示す受容体を検索した。コモンマーモセット 腸管組織上において、SEAは肥満し細胞に結合が認められるが、この結合性は組織切片をプロテアーゼまたは糖鎖分解酵素を反応させることで低下した。このため糖タンパク質がSEAの受容体であることが示唆された。前年度から引き続き酵母ツーハイブリッドシステムでSEA受容体の検索を行ったがSEAと高親和性を示す分子は得られなかった。上記実験と並行して免疫沈降法によりSEA受容体の分離を試みたところ、コモンマーモセット 腸管組織から抽出したタンパク質液からSEAと結合する分子が得られた。このタンパク質はfar western blottingによりSEAとの結合が確認され、また、SDS-PAGEでは複数のバンドに分かれることが明らかになり、複合体を形成することが示唆された。分離したタンパク質を質量分析にて複数回解析を行ったが同定に至らず、現在別の解析方法での同定を試みている。
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