2016 Fiscal Year Research-status Report
非アルコール性脂肪性肝疾患における変異型蛋白質PTPRD R995Cの機能解析
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16K19327
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| Research Institution | Asahikawa Medical College |
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Principal Investigator |
中嶋 駿介 旭川医科大学, 医学部, 助教 (80596289)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | STAT3 / 肝脂肪化 / 肝線維化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は、High throughput sequence法により非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)および非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)の病態進展に関与する遺伝子多型(SNP)として新規にPTPRD rs35929428を同定した。
PTPRD rs35929428の変異発現頻度を検討し、健常ボランティア群との比較にて非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)群では野生型(GG)に比して変異型(GA)群が多いことがわかった(p=0.015)。肝組織標本における検討ではGG群に対してGA群では線維化進展例が多く、脂肪沈着が多かった。
PTPRD rs35929428がコードする蛋白PTPRD R995Cを発現するベクターをヒト肝癌細胞株Huh7に導入し、PTPRD
R995Cの機能解析を行った。その結果、野生型PTPRDはIL-6刺激に対してSTAT3のリン酸化の明らかな亢進を認めたが、PTPRD R995Cは野生型に比べて、STAT3のン酸化の亢進の減弱が認められ、PTPRD R995CはSTAT3脱リン酸化のgain of functionである事が考えられた。
次に肝組織標本においてpSTAT3の免疫化学染色を行ったところ、PTPRD野生型のGG群と比較して変異型GA群ではpSTAT陽性率は低下しており、STAT3のリン酸化が減弱していることが示唆された。
以上のことからPTPRD R995CはSTAT3の脱リン酸化を亢進させることにより，STAT3を抑制することで肝脂肪化および線維化が誘導されている可能性が示唆された．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
in vitroにおけるPTPRD R995Cの機能解析についてはおおむね当初の計画通りに進行している。しかし、当初の計画書に記載されているSTAT3転写標的遺伝子産物の発現量に関しての詳細な検討は行えていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
in vitroの研究成果を元に遺伝子改変マウスを作成し、PTPRD R995Cの生体内における機能解析を行い、肝組織における脂肪沈着、炎症の程度、および肝線維化進展への関与に関して詳細な検討と解析を行っていく。
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| Causes of Carryover |
実験がまだ完遂していない部分の追加実験のために費用が必要となるため
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
追加実験のための物品費として使用予定
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