2018 Fiscal Year Annual Research Report
Investigation of ageing-related production of MPO-ANCA
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16K19475
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
永井 恵 筑波大学, 医学医療系, 講師 (00734352)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ミエロペルオキシダーゼ / ANCA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
わが国のANCA関連血管炎（AAV）は、MPO-ANCA陽性例が多く、高齢者に頻発する。そこで、高齢者のAAV発症原因と考えられるMPO-ANCA産生に関してヒト検体ならびに動物モデルの両面から以下のように検証する。1) 好中球含有顆粒の量および質の変化がMPO-ANCA産生に関与すると仮説し、健常者およびAAV患者の好中球内顆粒MPOおよびPTX3の相違点を明らかにする。2) 好中球から顆粒物質および自己核酸を放出する細胞死；NETosisは抗体産生を促し、加齢によっても変化するため、次に、動物実験でNETosisが与えるMPO-ANCA産生機構への影響を解明する。
ヒト好中球の解析は、目標症例数の解析に至らなかったものの、好中球顆粒MPO、PR3、PTX3の蛍光抗体染色によるイメージングフローサイトメトリ法で定量をもつ局在解析に成功した。その結果、高齢のAAV患者の好中球においてMPOとPR3の細胞内発現量が低下している一方で、わずかではあるがPTX3の細胞内発現量が上昇していることが示唆された。PR3は好中球の活性化に伴い細胞表面あるいは細胞外への局在変化を来すことが知られているが、PTX3も同様に好中球における局在変化を伴う可能性もある。
マウスにおけるNETosisの関与するMPO-ANCA産生を解析するための新たな免疫方法を樹立した。アルミニウムゲル腹腔内投与による免疫賦活により、NETosisが誘導されたが、同時に好中球顆粒PTX3が細胞外に放出されることを見出した。条件設定の上、リコンビナントmPTX3を腹腔内に同時投与した場合、MPO-ANCA産生が抑制された。ただし、KOマウスや中和抗体による確認実験が実施できず、PTX3がMPO-ANCA産生を負に制御しているかに結論はできないが、臨床応用に有望な標的分子の一つである可能性が示唆される。
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