2017 Fiscal Year Annual Research Report
Downregulation of miR-200a-3p, Targeting CtBP2 Complex, Is Involved in the Hypoproduction of IL-2 in Systemic Lupus Erythematosus-Derived T Cells.
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16K19602
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
楢崎 真理子 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (70773018)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 全身性エリテマトーデス / エピジェネティクス / microRNA / インターロイキン2 / miR-200a-3p / ZEB1 / ZEB2 / CtBP2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、後天的遺伝子発現修飾要因として注目されるmicro RNA (miR) のうち、全身性ループスエリテマトーデス (systemic lupus erythematosus; SLE) モデルマウス由来T細胞で発現低下を認めたmiR200a-3pが、抑制性転写因子 (ZEB1、ZEB2、CtBP2) の発現亢進を介して、T細胞の分化増殖に必須であるインターロイキン2 (IL-2) の産生低下を惹起している仮説をたて、その病態的意義を検証した。
マウスT細胞株であるEL4細胞にmiR200a-3p mimicを遺伝子導入し過剰発現させた結果、ZEB1、ZEB2、CtBP2のmRNA発現は低下し、in vitroではmiR-200a-3pのZEB2・CtBP2に加えZEB1への抑制性の制御が示唆された。同様の系でIL-2 の発現亢進を認めたことより、IL-2プロモーターを組み込んだpT81ルシフェラーゼベクターを用いたルシフェラーゼアッセイでIL-2プロモーター活性への影響をさらに検討し、miR-200a-3p導入によるプロモーター活性の上昇を確認した。miR-200a-3pによるZEB1、ZEB2、CtBP2のIL-2遺伝子への結合の影響を、SLEモデルマウス (MRL/lpr) 及び正常型マウス (B6) 由来T細胞を用いてクロマチン免疫沈降法 (ChIP)で確認した。正常型マウスではPMA/Ion刺激後6時間をピークにZEB1、CtBP2の結合が乖離したが、MRL/lprマウスではこの結合が9時間後も維持され、刺激後のZEB1、CtBP2の抑制が解除されないことによりIL-2産生が低下していると考えられた。
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